Exo70自身聚合的关键序列及其在乳腺癌细胞迁移过程中的作用

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乳腺癌是世界范围内女性癌症中发病率最高的恶性肿瘤。远处转移和复发是乳腺癌患者死亡的主要原因,因此乳腺癌转移的调控机制具有重要的医学研究价值。Exo70是胞外分泌复合体Exocyst的关键亚基,可通过参与Exocyst复合体的组装促进乳腺癌转移。ExO70还能发生自身聚合并影响乳腺癌细胞的迁移,独立于Exocyst复合物之外发挥作用。但该过程仍有问题需进一步明确,例如:Exo70自身聚合的关键序列目前尚不清楚;在乳腺癌转移过程中,ExO70自身寡聚与参与形成Exocyst复合物相比,是辅助作用还是同样重要?我们通过研究发现,ExO70自身形成二聚体的能力要显著强于其与Exocyst其它7个亚基的结合,提示Exo70自身聚合的重要作用。进一步,我们通过构建一系列的Exo70缺失突变体,通过蛋白免疫共沉淀实验逐渐缩小范围,最终确定了 ExO70形成聚合体的关键位置是位于氨基酸31~35与505~509中两段同样的序列“SLEKS”。进而利用这两个序列的缺失突变体转染到乳腺癌细胞,通过transwell迁移实验,证实这两段“SLEKS”序列在ExO70聚合体及乳腺癌细胞迁移过程中的关键作用。以上结果为ExO70独立于Exocyst复合体功能之外的新功能研究提供了依据,也为日后在乳腺癌及其转移的治疗过程中提供潜在的分子靶点。
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