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心力衰竭（心衰）是多种心血管疾病发展的终末阶段,同时是多种疾病引发死亡的重要原因。其中,冠心病导致的心肌缺血始终是引发心衰的首要因素之一。目前针对心衰机制的研究较多,其中神经体液兴奋机制已普遍被接受,该机制认为心衰早期交感神经系统最先被激活,随之带动肾素—血管紧张素—醛固酮系统、下丘脑—垂体系统、细胞因子和肽类信号系统的激活,多因素共同作用不断加重心衰的病理过程。临床研究证实小剂量的β1受体阻断剂可明显降低慢性心衰病人的死亡率。因此,心衰时交感神经活动增强的机制已成为心衰研究的焦点之一。神经解剖学证实脊髓交感节前神经元接受重要的心血管中枢—下丘脑室旁核（PVN）神经元活动的调节,Kang等人发现心衰时该中枢肾素—血管紧张素系统（RAS）、炎性细胞因子（PIC）及氧化应激反应增强并明显影响外周交感神经放电,心功能随之恶化。但导致中枢内这些体液因子变化的因素尚未确定。以往的研究发现核转录因子-κB（NF-κB）是细胞内调节炎症及应激反应的重要因子之一,许多因素可以使胞浆内的IκB激酶（IKK）发生磷酸化,进而使抑制性蛋白IκB发生磷酸化并从NF-κB解离,暴露NF-κB的活性部位（p50或p65）,与核内目的基因的启动子或增强子上特定的κB位点结合,启动和调控目的基因的转录。研究证明NF-κB对RAS、PIC及部分超氧化物的生成有至关重要的调节作用,但它在心衰时PVN区域的作用尚未见报道。本研究首先探讨了PVN区域的NF-κB是否参与了心衰时外周神经体液的兴奋作用。取体重在250～275克之间的雄性SD大鼠,首先接受侧脑室插管术（通过此路径给药）,2天后制作心衰动物模型或假手术模型,方法:经气管插管连接呼吸机,开胸结扎冠状动脉左前降支（假手术组不必结扎）,关胸后大鼠给予正常饲养,同时经侧脑室插管连接渗透压泵给予干预药物—SN50（NF-κB作用的抑制剂,2μg/h.ICV）或空白对照药物（vehicle,人工脑脊液,0.25μl/hr.ICV）。4周后,测血流动力学观察心功能;计算右心室/体重比（RVW/BW）,肺/体重比（lung/BW）反映左心前负荷变化;取脑组织及外周血,观察PVN区域神经元激活情况（Fra-LI的表达）,NF-κB亚基p50以及NF-κB激活标志物之一p-IKKβ（磷酸化IκB激酶）的表达,测量外周血去甲肾上腺素（NE,代表交感神经活动情况）和血管紧张素Ⅱ（ANGII,代表外周体液因素的变化）的水平。结果:心衰大鼠与假手术大鼠比较心功能明显低下(左室舒张末期压力LVEDP,±dp/dtmax比较,P＜0.05),左心前负荷升高（RVW/BW,lung/BW,P＜0.05）,PVN区域的Fra-LI、NF-κBp50以及p-IKKβ表达增加（P＜0.05）,外周血NE和ANGII升高（P＜0.05）;接受SN50治疗的心衰大鼠与vehicle治疗的心衰大鼠比较,LVEDP,RVW/BW和lung/BW有所降低（P＜0.05）,±dp/dtmax升高（P＜0.05）,PVN区域的Fra-LI、NF-κBp50以及p-IKKβ表达减少（P＜0.05）,外周血NE和ANGII下降（P＜0.05）。结论:以上结果说明心衰时PVN区域的NF-κB被明显激活并参与了心衰时外周神经体液兴奋机制。随后,本研究更进一步探讨了心衰时PVN区域的NF-κB是否通过促进局部RAS、PIC及超氧化物的生成参与了心衰时外周神经体液的兴奋作用。采用的研究方法基本与第一部分相同,侧脑室给予的干预药物分别包括:洛沙坦（LOS,AT1-R阻断剂,20μg/h.ICV）,已酮可可碱（PTX,TNF-α合成抑制剂,10μg/h.ICV）,tempol（TEMP,氧化物清除剂,80μg/h.ICV）,SN50或vehicle。结果:1)4周后,LOS与SN50的治疗均降低了心衰大鼠的LVEDP,RVW/BW和lung/BW（P＜0.05）,±dp/dtmax升高（P＜0.05）,外周血NE和ANGII（P＜0.05）,LOS减少了PVN区域的NF-κBp50,p-IKKβ以及血管紧张素转换酶（ACE）表达（P＜0.05）,SN50下调了PVN区域ACE表达（P＜0.05）,该结果说明心衰时PVN区域的RAS参与了NF-κB的激活,NF-κB进一步促进了中枢RAS的神经体液兴奋作用;2)4周后,PTX与SN50的治疗均降低了心衰大鼠的LVEDP,RVW/BW和lung/BW（P＜0.05）,±dp/dtmax升高（P＜0.05）,外周血NE和ANGII（P＜0.05）,PTX减少了PVN区域的NF-κBp50,p-IKKβ,TNF-α以及IL-1β表达（P＜0.05）,SN50下调了PVN区域TNF-α和IL-1β表达（P＜0.05）,该结果说明心衰时PVN区域的PIC参与了NF-κB的激活,NF-κB进一步促进了中枢PIC的神经体液兴奋作用:3)4周后,TEMP与SN50的治疗均降低了心衰大鼠的LVEDP,RVW/BW和lung/BW（P＜0.05）,±dp/dtmax升高（P＜0.05）,外周血NE和ANGII（P＜0.05）,TEMP减少了PVN区域的NF-κBp50,p-IKKβ,DHE以及gp91phox表达（P＜0.05）,SN50下调了PVN区域DHE以及gp91phox表达（P＜0.05）,该结果说明心衰时PVN区域的氧化应激反应参与了NF-κB的激活,NF-κB进一步促进了中枢超氧化物的神经体液兴奋作用。结论:综合以上结果说明:1、心衰时PVN区域的NF-κB被明显激活并参与了心衰时外周神经体液兴奋的机制;2、心衰时PVN区域的RAS参与了NF-κB的激活,NF-κB进一步促进了中枢RAS的神经体液兴奋作用;3、心衰时PVN区域的PIC参与了NF-κB的激活,NF-κB进一步促进了中枢PIC的神经体液兴奋作用;4、心衰时PVN区域的氧化应激反应参与了NF-κB的激活,NF-κB进一步促进了中枢超氧化物的神经体液兴奋作用。心血管中枢PVN区域的NF-κB对心衰的发生发展起着至关重要的推动作用。胰岛的内分泌活动受自主神经调节,有研究认为自主神经功能异常可能是加重糖尿病的原因之一,其中包括交感神经的激活。为了深入探讨交感神经在2型糖尿病中的作用机制,本研究采用化学性交感神经阻断术来降低外周交感神经活动,即实验动物静脉给予6-羟基多巴胺（6-OHDA;100 mg/kg）,观察胰岛素分泌的变化,心功能和肾功能的改变,并探讨其可能机制。雄性SD大鼠（80-100g）给予高脂饮食,6周后,空腹状态下大鼠腹腔注射链尿佐菌素（STZ,35mg/kg,i.p.）制作2型糖尿病大鼠模型,对照组大鼠给予正常饮食,腹腔注射柠檬酸盐缓冲液。2天后取空腹血测血糖和胰岛素,同时静脉一次性注射6-OHDA或对照药物（vehicle,PBS溶解的维生素C溶液）。此后,所有实验大鼠给予正常饮食。4周后,免疫组化方法观察多巴胺-β-羟化酶（DBH,反映交感神经活动的指标）在胰岛、心脏和肾脏的表达,以证实这些组织内的交感活动被降低;取大鼠空腹静脉血,测血糖,胰岛素,肾功能指标（血尿素氮、肌酐）:血流动力学测大鼠心功能(LVEDP和±dp/dtmax);免疫组化方法检测心脏PKC-βⅡ和肾脏TGF-β。Western blot检测肾脏TGF-β。结果显示6-OHDA降低了DBH在糖尿病大鼠和正常大鼠胰岛、心脏和肾脏的表达;vehicle治疗组糖尿病大鼠血糖、尿素氮和肌酐水平明显高于6-OHDA治疗组糖尿病大鼠,而胰岛素水平在两组间无明显差异;6-OHDA治疗组糖尿病大鼠心功能较vehicle治疗组糖尿病大鼠明显改善。糖尿病大鼠心脏PKC-βⅡ和肾脏TGF-β表达均高于正常大鼠,6-OHDA有效地降低了二者的表达。上述研究结果提示:1、阻断交感神经的作用能增加胰岛内β细胞的数量,但不能提高胰岛素的水平;2、2型糖尿病早期,交感神经活动可诱导心肌PKC-βⅡ的表达,其结果促进心功能的减退;3、2型糖尿病早期,交感神经活动可诱导肾脏TGF-β的表达,其结果促进肾功能的减退。