微流控芯片和质谱技术在药物筛选中的研究与应用

来源 :清华大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuzhao123456
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
近年来,中枢神经系统类药物的研发进展缓慢,大多数体外疗效好的候选药物在临床试验中却无法渗透通过血脑屏障或难以扩散至脑部靶组织,从而极大影响了疗效。因此,构建体外模型以提前对候选药物的血脑屏障渗透性、细胞毒性等性质进行评价,可极大地提高中枢神经系统类药物的研发效率。其次,代谢组学技术常用于研究药物的作用机制,并对药物筛选及结构优化都有着很重要的意义。因此,本论文通过构建微流控芯片和代谢组学平台以研究药物的渗透性、细胞毒性和作用机理等药理学性质,具体内容如下:1、构建了一个模拟血脑屏障和脑部三维结构的微流控芯片平台,并直接用于评测药物渗透通过血脑屏障的能力和对靶向脑细胞的毒性效果。hCMEC/D3细胞动态培养于微通道的半透膜上,以重现体内血脑屏障模型的特性,并用于药物渗透性评测。神经胶质瘤U251细胞则三维培养于琼脂凝胶中以用于后续的药物毒性实验。渗透性实验中,先用微固相萃取芯片(μSPE)对模型药物——舒尼替尼进行除盐和富集,再将药物洗脱后导入质谱(ESI-Q-TOF MS)中进行在线测定。最后,舒尼替尼测得的渗透率为(5.57±0.52)×10-5cm s-1,与文献报道一致,且整个分析过程仅需约30分钟和5微升样品。药物毒性的结果也更接近体内数据,这表明三维培养的脑组织细胞模型可进一步模拟药物在脑部组织中的扩散和细胞毒性。总体而言,该平台可同时表征中枢神经系统类药物的血脑屏障渗透率和对脑部靶点的疗效,并有望用于药物的高通量筛选。2、近期研究发现,夫拉平度对细胞的作用机理十分复杂,不仅会诱使增殖细胞发生细胞周期阻滞,还会诱发静息细胞凋亡。然而,此前的研究只关注于特定的基因或蛋白而无法合理地解释该现象,所以我们通过代谢组学平台全面地研究夫拉平度的作用机制。首先,我们利用UPLC/Q-TOF MS平台筛选出显著的差异代谢物及其代谢通路,再结合传统生物学的方法对代谢紊乱的机制进行验证。最终分析结果显示,夫拉平度会诱使MCF-7细胞发生氧化应激和细胞周期阻滞从而影响其多个代谢通路,并最终导致癌细胞死亡。
其他文献
目的 探讨危重烧伤患者血栓弹力图、凝血指标及血小板变化的临床意义.方法 回顾性分析烧伤科收治的55例危重烧伤患者,于烧伤后3d内(渗出期)检测血栓弹力图(TEG)、凝血指标和血小
肺栓塞在死亡原因中高居第3位,抗凝及溶栓治疗可使致死性肺栓塞的病死率明显下降。文中就临床常用药物的给药方法、剂量设定以及注意事项等问题进行了简要阐述。
由文学剧本《定军山》改编的电影《西洋镜》以其精良的配乐和音乐设计在电影配乐史上产生了重要的影响,通过分析影片的原创配乐段落和有源音乐的应用,学习认识电影音乐的作用
中华民族素以礼仪之邦饮誉四海,以崇尚道德教化扬名八方。古代礼仪所涉及的范围十分广泛,几乎渗透到社会的各个方面,为实现人与人、人与社会的和谐起到很大作用。$$礼仪从它产生
报纸
<正>英国剧场技师协会(Association of British Theatre Technicians,简称ABTT,成立于1961年)于1972年制作了第一部剧院设计和规划指南。在1986年修订后,成为任何涉及剧院建
<正> 流经特雷维格利奥村的河水里漂着一具年轻男人的尸体,皮肤黝黑,中等身材,是许许多多意大利人中的一位,象他们这号人成百上千,都长得一个模样,全都黑黝黝,中等个儿,擅长
期刊
摆动握臂式防叠机构是络筒机的一种机械式防叠装置,为了解其运动学特性,采用矩阵解析法建立防叠机构的运动方程,并运用MATLAB软件进行数值求解,得到各构件的运动特征曲线。结
暖色系的膨胀视觉作用,让车看起来“变大了”,增加“近感”;冷色系所形成的收缩视觉,让车看起来“变小了”,增加“远感”。$$ 如果在你面前有两辆大小一样、型号相同、配置一致
报纸
较高的网络交易风险感知是在线购物发展的重要障碍。以低接触商品为研究对象,通过外围提示来衡量在线交易者的风险感知,利用Tobit模型验证在线交易者风险感知、外围提示及购