尖锐湿疣患者外周血Th细胞亚群、NK细胞活性的研究

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目 的: 从辅助性T(Th)细胞极化、自然杀伤细胞(NK)内分泌γ-干扰素和CD69表达等层次,探讨不同病程尖锐湿疣(CA)患者的细胞免疫状态,为临床免疫治疗提供指引。方法: 取肝素抗凝血,用密度梯度离心法分离出血浆和外周血单个核细胞(PBMC),进行细胞培养和免疫荧光染色:(1)PHA(20μg/mL)和自身血浆刺激PBMC诱导T细胞极化,72小时后收获细胞,分别标记anti-CD4-PE与anti-CCR5-FITC和anti-CD4-FITC与anti-CCR3-PE;(2)PDB(10-7mol/L)刺激PBMC,使NK细胞活化,2、12、24h后收获细胞,进行anti-CD56-FITC与anti-CD69-PE免疫标记;(3)PDB(10-7mol/L)、Ionomycin(1mg/mL)和Monensin(2mM)刺激PBMC,4h收获细胞,用anti-CD56-PE与anti-IFN-γ-FITC细胞内染色,最后利用流式细胞仪对标记细胞进行分析。结果: 1.外周血CD4+T淋巴细胞向Th1/Th2方向极化情况:对照组Th1/Th2的极化细胞百分率分别是(16.68±1.56)%/(16.46±1.12)%。尖锐湿疣患者中,短病程组与长病程组Th1/Th2极化细胞百分率分别为(25.82±2.22)%/(14.80±1.14)%与(12.20±1.37)%/(13.74±0.99)%,两组极化细胞百分率分别与正常对照组比较均存在显著性差异(P<0.05),短病程组Th1/Th2的比值为1.75±0.17,呈Th1型反应,而长病程组为0.89±0.11,呈Th2型反应。 2.NK细胞活性情况:在体外条件下,对照组NK细胞受刺激2、12、24h后,CD69阳性细胞百分率分别为(62.99±3.62)%、(80.97±2.16)%、 硕士生毕业论文(2001)尖锐诅疣鹰者外周血h间囱亚屏、NK $胞活性的研究 (91.26fi.83)$;长病程组各时点的百分享分别是(25.73L2.99)X、 (57·0814·74)K、(67.07f2.52)K,与对照组各时点百分率相比较 均有显著性差异(P<0刀5),短病程组各时点百分率分别为 (62.22士3.01)X、(BO.67土2.20)K、(90.30土2.75)K,与对照组比 较均无显著性差异(P>0刀5)。短病程组 IFN.Y阳性 NK细胞比率为 (61.9 Ic348)%,而对照组为(61石H3.65)%,两组比较无显著性差异 (P>o.05)。长病程组的比串是(34.6 WW3.36)x,与对照组比较有显著性 差异(P<0刀5)。 结论: 短病程尖锐湿疣患者机体呈现Thl型反应,而长病程者则以ThZ型反应 为主,存在hl型反应向ThZ型反应切换的现象。同时,短病程患者NK细胞 活化和功能均正常,但长病程者NK细胞活化明显不足和功能严重障碍。本试验 结果不仅丰富了尖锐湿疣患者细胞免疫缺陷理论,而且为尖锐湿疣患者尤其是 长病程者的免疫治疗提供理论依掘和新的指引。
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