胰腺肿瘤治疗靶点挖掘与微创手术治疗评价

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目的:选择胰腺内、外分泌代表性肿瘤进行研究,旨在通过胰腺导管腺癌潜在治疗靶点的挖掘和对胰腺神经内分泌肿瘤微创手术治疗方式的效果评价,为胰腺肿瘤治疗靶点和微创术式的选择提供新的思路。方法:在外分泌肿瘤中,免疫组化检测CUL4B在胰腺导管腺癌组织中的表达及其临床相关性,同时筛选CUL4B低/高表达细胞株;构建沉默和过表达CUL4B的胰腺癌稳转细胞系,结合分别观察细胞形态变化、MTT法检测增殖活性变化、流式细胞术分析细胞周期情况、划痕实验和Transwell检测细胞迁移和侵袭能力变化,裸鼠转移瘤模型检测细胞系体内转移能力变化。最后通过Western blot和q RT-PCR通过检测Wnt/β-catenin通路和EMT过程的标志物挖掘CUL4B可能的促癌机制。内分泌肿瘤中,回顾性分析我院从2010年9月至2017年1月行机器人和腹腔镜胰体尾切除术治疗的74例胰腺神经内分泌肿瘤病人资料,观察、对比两组临床资料,初步评价两种手术方式在治疗胰腺神经内分泌肿瘤中的优劣。结果:在统计的64对胰腺导管腺癌病人组织中,癌组织与相应癌旁组织相比CUL4B和β-catenin表达显著上调,且高表达的病例预后显著较差(P=0.04)。在胰腺癌细胞株中CFPAC-1中CUL4B表达量较高,PANC1中表达量较低。在胰腺癌细胞株CFPAC-1中沉默CUL4B后细胞生长速度显著变慢,迁移和侵袭能力及体内转移能力显著减弱,同时Wnt/β-catenin通路和EMT过程的标志物表达显著下调。在PANC1细胞系中过表达CUL4B后细胞生长速度变快,迁移和侵袭能力及体内转移能力显著增强,同时Wnt/β-catenin通路和EMT过程的标志物表达显著上调。74例行微创胰体尾切除术治疗的胰腺内分泌肿瘤患者均顺利完成手术。机器人手术组的术中出血量明显少于腹腔镜手术组(P<0.001),而保脾率明显高于腹腔镜手术组(P=0.006)且在保脾方式上,机器人手术组行Kimura法的概率亦明显高于腹腔镜手术组(P<0.001)。此外在G2和G3级病例中,机器人手术组的淋巴结收获枚数也明显高于腹腔镜手术组(P<0.001)。两组在年龄、性别、BMI、ASA评分、手术时间、术中输血率、术后并发症发生率、胰瘘率、术后住院天数、二次手术率和肿瘤大小等方面均无明显差异。结论:CUL4B能够通过激活Wnt/β-catenin通路正向调控胰腺导管腺癌细胞EMT过程,从而促进其进展转移,CUL4B是胰腺癌的潜在治疗靶点。微创胰体尾切除术治疗胰腺神经内分泌性肿瘤安全、可行,机器人手术方式优势明显,对于有保脾指征的病例主张首选机器人手术。
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