大鼠离体心肌骨骼肌中肌红蛋白降解与死亡时间的相关性研究

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目的:运用免疫印记(western blot)法检测大鼠死后离体心肌骨骼肌中肌红蛋白在高温(30℃)和低温(10℃)两种环境下含量的变化,研究在不同温度下肌红蛋白降解的规律,探讨其降解规律与死亡时间的关系,旨在为法医学死亡时间的推断提供科学依据。方法:将健康SD大鼠16只,雌雄不限,体重200g±50g,,随机平均分为高温组和低温组,每组8只。将16只大鼠头部置于封闭的橡胶手套内,并用手掌固定其四肢和躯干,直至缺氧窒息死亡,提取大鼠的心肌和骨骼肌,放置于保湿盒后,置于人工气候箱中(高温组温度恒定为30℃,低温组温度恒定为10℃,湿度恒定40%)。分别于大鼠死后0h、12h、24h、36h、48h、60h、72h,应用免疫印记(western blot )法检测各组大鼠心肌和骨骼肌中肌红蛋白随死亡时间的变化,并结合医学图像分析技术以及统计学方法进行结果分析,比较大鼠离体心肌、骨骼肌肌红蛋白在高温和低温情况下降解规律之间的异同,探讨肌红蛋白降解规律与死亡时间的关系,并计算各参数与死亡时间的相关系数,求出回归方程。结果:1、高温和低温条件下,大鼠心肌、骨骼肌肌红蛋白的含量均随着死亡时间的延长而呈下降的趋势,与死亡时间具有相关性。2、高温情况下骨骼肌肌红蛋白和心肌肌红蛋白的降解速度比低温情况快。3、高温和低温条件下,骨骼肌肌红蛋白均比心肌肌红蛋白降解慢。结论:1、在30℃和10℃条件下,大鼠骨骼肌和心肌肌红蛋白降解情况不完全一致,但是都呈现规律性变化趋势,与死亡时间有一定的关系,其变化规律可作为推断死亡时间的指标之一,服务于法医学实践。2、温度会影响到离体组织肌红蛋白的降解速度,在一定范围内会随着温度的升高而加快,开展温度对推断死亡时间影响的研究很有法医学意义。3、免疫印记(Western blot)法技术操作简单且易行,适合法医学研究和实际检案工作的需要。
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