【摘 要】
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本文旨在研究水飞蓟素(silymarin)对幼草鱼生产性能、肠道结构完整性的影响及其机制。选择2160尾健康草鱼(均重=24.2±0.1 g)进行十周的生长试验,试验设置了含0、20、40、60、80和100 mg/kg六个水平的水飞蓟素饲粮组。生长试验结束后,测定幼草鱼的生长性能和肠道生长相关指标,随后进行嗜水气单胞菌攻毒试验研究水飞蓟素对幼草鱼肠道结构完整性(包括抗氧化损伤能力、细胞凋亡和顶端
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本文旨在研究水飞蓟素(silymarin)对幼草鱼生产性能、肠道结构完整性的影响及其机制。选择2160尾健康草鱼(均重=24.2±0.1 g)进行十周的生长试验,试验设置了含0、20、40、60、80和100 mg/kg六个水平的水飞蓟素饲粮组。生长试验结束后,测定幼草鱼的生长性能和肠道生长相关指标,随后进行嗜水气单胞菌攻毒试验研究水飞蓟素对幼草鱼肠道结构完整性(包括抗氧化损伤能力、细胞凋亡和顶端连接复合体(AJC))的影响及其机制。结果显示,适量水飞蓟素显著提高了幼草鱼增重百分比、采食量和饲料效率以及肠道生长相关指标(IL、ILI、IW和ISI)(P<0.05),降低了肠粘膜通透性并改善肠表观形态,改善了草鱼肠道结构完整性。水飞蓟素改善幼草鱼肠道结构完整性可能与肠道抗氧化损伤能力、抑制肠道细胞凋亡及肠道顶端连接复合体的结构有关,相关的研究结果如下:适量水飞蓟素显著降低了幼草鱼前、中、后肠ROS、MDA和PC的含量(P<0.05),增加了SOD、CAT、GPx、GST、GR等相关酶活力及其基因表达(除了GSTP1)(P<0.05),下调了绑定蛋白Keap1a(而不是Keap1b)的m RNA水平(P<0.05),上调信号分子Nrf2的m RNA水平(P<0.05);下调鱼肠道caspase(-2,-3,-7,-8和-9)和促凋亡因子Bax、Apaf-1、Fas L(仅在后肠)的m RNA水平和上调了肠道抗凋亡因子Bcl-2、Mcl-1和IAP的m RNA水平(P<0.05),降低相关信号分子p38MAPK和JNK的m RNA水平(P<0.05);上调了屏障形成紧密连接相关蛋白(TJs)ZO-1、ZO-2b(只在后肠)、claudin(-b、-c、-f、-3c和-11(非claudin-7a和-7b))和粘附连接相关蛋白(AJs)E-cadherin、α-catenin、β-catenin、nectin和afadin的m RNA水平(P<0.05)和下调孔隙形成TJs claudin-12和-15a(非claudin-15b)的m RNA水平(P<0.05),降低了相关信号分子Rho A、ROCK、MLCK和NMⅡ的m RNA水平(P<0.05)。综上所述,饲粮中适宜水平的水飞蓟素促进了幼草鱼的生长,改善了肠道结构完整性。水飞蓟素改善草鱼肠道结构完整性的作用机制如下:可能通过激活Keap1a(而不是Keap1b)/Nrf2信号通路提高抗氧化酶活力从而提高鱼肠道抗氧化损伤能力;可能通过抑制JNK和p38MAPK信号通路介导的线粒体途径和死亡受体途径(非前、中肠)而抑制细胞凋亡;可能通过抑制Rho A/ROCK信号通路(Rho A/ROCK/MLCK/NMⅡ)调控肠道上皮顶端连接复合体的结构,从而保障细胞间结构完整性。根据鱼生长性能指标(PWG)、肠道粘膜通透性指标(D-乳酸)和氧化损伤指标(PC)确定幼草鱼(24-223 g)饲粮中水飞蓟素的最适添加量分别为57.63、57.50和57.10 mg/kg。
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