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【目的】用含胃泌素(Gastrin)基因的真核表达载体pcDNA3.1/gastrin转染胃癌细胞,获得稳定表达胃泌素基因的胃癌细胞株;研究高表达胃泌素和外源性胃泌素对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭及肿瘤转移相关蛋白分泌能力的影响,为胃泌素对胃癌细胞转移的影响提供一定的理论和实验依据。 【方法】根据人胃泌素基因序列设计并构建含胃泌素基因的真核表达载体pcDNA3.1/gastrin;以脂质体转染法将含胃泌素的载体转染人胃癌细胞株AGS、SCG-7901,经G418筛选出稳定转染细胞株;通过细胞划线实验研究高表达胃泌素对胃癌细胞株迁移能力的影响;通过细胞划线实验、Transwell小室实验研究经终浓度0nmol/L、10nmol/L、100nmol/L外源性胃泌素处理后的胃癌细胞株侵袭、迁移能力的变化;利用MTT法检测胃癌细胞增殖能力的变化;通过ELISA法检测细胞上清液中胃泌素和基质金属蛋白酶2(MMP-2)浓度。 【结果】经测序证实真核表达载体pcDNA3.1/gastrin构建成功,G418筛选获得稳定转染胃泌素基因的胃癌细胞株AGS、SCG-7901;高表达胃泌素的细胞与对照组(稳定转染空载体细胞)相比,其迁移、增殖能力增强;经终浓度为10nmol/L、100nmol/L外源性胃泌素处理的胃癌细胞与对照组(0nmol/L)比较,其迁移、侵袭及细胞增殖能力增强,且100nmol/L胃泌素处理组细胞侵袭等能力较10nmol/L胃泌素处理组细胞强;高表达胃泌素细胞与外源性胃泌素处理后的细胞与相应对照组细胞比较,其分泌MMP-2能力增强。 【结论】1.成功构建真核表达载体pcDNA3.1/gastrin,并获得稳定转染Gastrin基因的胃癌细胞株AGS、SGC-7901;2.外源性胃泌素能增强胃癌细胞株AGS、SGC-7901的迁移、侵袭及细胞增殖能力;3.高表达的胃泌素可增强胃癌细胞迁移及细胞增殖能力;4.胃泌素能增强胃癌细胞MMP-2的分泌,推测胃泌素促进胃癌细胞发生转移。