RFC(replication factor C,复制因子C)是一种首先从人类宫颈癌Hela细胞提取物中纯化的DNA体外复制的必需因子,并普遍存在于真核生物中。随着研究的不断深入,RFC复合蛋白复合物作为一个整体,其在DNA复制和修复及细胞分裂增殖与抗逆生长中的重要功能也逐渐被人们所认识。但植物中有关RFC各亚基的生物学功能及其对植物生长发育的调控等,仍是当前学科发展中亟待解析的问题之一。本研究通过RNAi干涉试验筛选获得rfc5突变体纯合子,然后以WT、rfc5、 rfc3-1、rfc5rfc3和rfc3-1/RFC3植株为材料,研究了基因突变对植株抗逆性及其抵抗不同浓度DNA复制毒性物质甲基磺酸甲酯(Methyl Methanesulfonate,MMS)和顺铂(cisplatin)的影响,解析了RFC5基因对拟南芥生长发育的调控作用。获得如下主要试验结果:1.通过筛选获得了表型稳定的rfc5突变体,与野生型植株相比,rfc5纯合子植株具有株型较小,早花,叶片较小、叶缘锯齿不明显,分枝甚少,根系较短且侧根较少等表型,说明AtRFC5基因突变显著影响了植株的生长发育。2.将rfc5突变体与生长发育相关突变体rfc3、rfc1和pcna2杂交,得到了杂交后代双突变体植株。通过特异引物PCR鉴定了rfc5rfc3双突变体纯合子植株,而rfc5rfc1、c5pcna2双突变体植株有待于进一步的检验。3.随着MMS和cisplatin浓度上升,WT、rfc3-1和rfc3-1/RFC3植株生长受抑制程度而增强,rfc3-1植株主根长和真叶数极显著或显著少于WT和rfc3-1/RFC3植株的,遗传互补植株rfc3-1/RFC3则恢复了rfc3-1的野生型表型。荧光定量PCR结果则进一步印证了rfc3-1植株的抗复制损伤修复能力被削弱,表明AtRFC3对植株抗DNA复制损伤修复和抗性生长具有重要调控作用。4.AtRFC5基因突变削弱了rfc5植株抗复制损伤修复能力,荧光定量PCR结果与rfc3-1和rfc5rfc3植株离体叶片的电导率,进一步说明了RFC5基因突变削弱了植株的抗性,AtRFC5对植株抗DNA复制损伤修复和抗性生长具有重要调控作用。