【摘 要】
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[目的]探索转录相关增强子-1(RTEF-1)对血管平滑肌细胞(VSMC)衰老的影响及机制。[方法]用10g/L的D-半乳糖(D-gal)处理人主动脉平滑肌细胞(HASMC)72h,鉴定细胞衰老并检测细胞中RTEF-1的表达改变。转染全长RTEF-1 c DNA或RTEF-1si RNA入HASMC建立RTEF-1过表达(o/e)或阻抑细胞,再用D-gal处理,观察细胞表型、增殖迁移、粘附改变、细
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[目的]探索转录相关增强子-1(RTEF-1)对血管平滑肌细胞(VSMC)衰老的影响及机制。[方法]用10g/L的D-半乳糖(D-gal)处理人主动脉平滑肌细胞(HASMC)72h,鉴定细胞衰老并检测细胞中RTEF-1的表达改变。转染全长RTEF-1 c DNA或RTEF-1si RNA入HASMC建立RTEF-1过表达(o/e)或阻抑细胞,再用D-gal处理,观察细胞表型、增殖迁移、粘附改变、细胞骨架聚合的变化及对血清应答因子(SRF)及心肌素(MYOCD)基因表达的影响,给予SRF-MYOCD的抑制剂CCG-100602干预D-gal处理的RTEF-1 o/e细胞,检测上述指标。[结果]同对照组相比,D-gal处理的HASMC的SA-β-gal阳性率增加(P<0.05),SOD活力降低,MDA含量增加,同时细胞增殖率增加,G0/G1期细胞比例减少,S期增加,且RTEF-1表达下降(所有P<0.01);RTEF-1可抑制衰老HASMC的增殖迁移(P<0.01),上调α-SMA(P<0.05)、calponin(P<0.01)的表达,下调osteopontin、整合素β3及paxillin的表达(P<0.01),下调osteocalcin、整合素α5及vinculin的表达(P<0.05),使G-actin/F-actin比例下降(P<0.01),细胞骨架聚合,SRF及MYOCD的表达上调(P<0.01),RTEF-1 si RNA的作用与此相反,CCG-100602可部分逆转RTEF-1的作用。[结论]D-gal可诱导VSMC衰老,衰老VSMC中RTEF-1表达下调。RTEF-1可抑制衰老VSMC由收缩表型转换为分泌及成骨化表型,并降低VSMC的增殖、迁移及粘附,使细胞骨架聚合增加,维持收缩功能。其机制与RTEF-1调控SRF/心肌素信号通路有关。
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