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目的:观察转移抑制基因nm23-H1对经香烟烟雾提取物处理的人肺腺癌细胞株A549侵袭能力的影响;并初步探讨香烟烟雾提取物处理后A549细胞nm23-H1表达下调机制。
方法:应用含1%香烟烟雾提取物的培养液处理A54916周,16周细胞继续给予脱毒培养8周,得到两种处理后的细胞。应用nm23-H1野生质粒转染上述两种细胞,同时设置空质粒转染组及未转染组作为对照,采用RT-PCR和western blot分别检测六组细胞中nm23-H1的mRNA转录和蛋白表达水平;Transwell小室及划痕试验检测细胞侵袭迁移能力;采用甲基化特异性PCR(MSP)检测处理及未处理细胞的nm23-H1基因的甲基化水平。
结果: RT-PCR和western blot结果均显示转染野生质粒组细胞nm23-H1的mRNA转录和蛋白表达皆上调,与其他组相比差异具有显著性;Transwell小室及划痕试验结果都表明转染野生质粒组细胞迁移能力降低,与其他组相比差异具有显著性;MSP结果显示,香烟烟雾提取物处理A549细胞后nm23-H1基因启动子甲基化水平增加。
结论:香烟烟雾提取物诱导肺腺癌细胞侵袭迁移能力增强与nm23-H1基因表达下降密切相关;香烟烟雾提取物诱导的肺腺癌细胞nm23-H1表达下降的机制中存在DNA甲基化。