【摘 要】
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目的本研究旨在探讨布比卡因蛛网膜下腔阻滞是否通过大鼠脊髓p-AMPK/BDNF信号通路调节GlyT1的表达,以探究布比卡因椎管内阻滞的镇静作用机制。方法建立SD大鼠的蛛网膜下腔阻滞模型,在蛛网膜下腔置管成功后,将大鼠随机分为生理盐水组（NS,n=6）和布比卡因组（Bup,n=6）,分别将20ul生理盐水或20ul 0.5%布比卡因注射到大鼠的蛛网膜下腔,15min后提取大鼠的脊髓腰膨大组织,采用W
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目的本研究旨在探讨布比卡因蛛网膜下腔阻滞是否通过大鼠脊髓p-AMPK/BDNF信号通路调节GlyT1的表达,以探究布比卡因椎管内阻滞的镇静作用机制。方法建立SD大鼠的蛛网膜下腔阻滞模型,在蛛网膜下腔置管成功后,将大鼠随机分为生理盐水组（NS,n=6）和布比卡因组（Bup,n=6）,分别将20ul生理盐水或20ul 0.5%布比卡因注射到大鼠的蛛网膜下腔,15min后提取大鼠的脊髓腰膨大组织,采用Western blot实验技术检测大鼠脊髓组织中BDNF和GlyT1的蛋白表达水平;培养大鼠脊髓原代星形胶质细胞,采用不同浓度的布比卡因（1m M、2m M、3m M）处理细胞2h,随后采用Western blot、免疫荧光技术检测脊髓星形胶质细胞中p-AMPK、BDNF和GlyT1的蛋白表达情况;在大鼠脊髓原代星形胶质细胞中,使用不同浓度的7,8-DHF（BDNF受体激动剂）处理细胞2h,然后采用Western blot、免疫荧光技术检测细胞中GlyT1的蛋白表达情况;在培养的大鼠脊髓原代星形胶质细胞中,采用AMPK sh RNA阻断AMPK信号分子后,使用2m M布比卡因处理细胞2h,随后采用Western blot、qPCR技术检测细胞中p-AMPK、BDNF的蛋白表达变化和BDNF m RNA的表达情况。结果在动物实验中,布比卡因组与生理盐水组相比,大鼠脊髓组织中GlyT1的表达显著减少（P＜0.05）,BDNF的表达明显增加（P＜0.05）;在脊髓原代星形胶质细胞中,布比卡因剂量依赖性的降低了细胞中GlyT1的蛋白表达（P＜0.05）,并浓度依赖性的增加了p-AMPK、BDNF的蛋白表达（P＜0.05）;在使用不同浓度工具药7,8-DHF处理脊髓星形胶质细胞之后,GlyT1蛋白表达呈剂量依赖性降低（P＜0.05）;在使用AMPK sh RNA阻断AMPK信号分子之后,布比卡因对BDNF表达的增强作用减弱（P＜0.05）。结论布比卡因蛛网膜下腔阻滞可能通过激活p-AMPK/BDNF信号通路抑制大鼠脊髓星形胶质细胞中GlyT1的表达,从而增强脊髓抑制性神经递质-甘氨酸能神经传递,阻断外周感觉信息对大脑皮层的刺激,产生镇静作用。
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