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目的本研究采用Lieber-Decarli酒精液体饲料建立小鼠AFL模型,观察维生素D缺乏对小鼠酒精性脂肪肝发病的影响。方法将6周龄C57BL/6J雄鼠按照完全随机分组原则分为正常对照组(Control),维生素D缺乏组(VDD),酒精组(EOH)和酒精+维生素D缺乏组(EOH+VDD)。酒精组小鼠喂养改进的含有乙醇的Lieber-De Carli液体饲料(含4%(w/v)酒精),正常对照组以不含乙醇的普通液体饲料喂养小鼠,单纯维生素D缺乏组以缺乏维生素D且不含乙醇液体饲料喂养小鼠,酒精+维生素D缺乏组用不含维生素D的乙醇液体饲料喂养小鼠。喂养期间记录各组小鼠的每天饲料摄入量和每周体重,连续喂养6周,实验结束后对小鼠进行剖杀,眼球取血收集血清,用于检测后续血脂、ALT和AST活力、25(OH)D及炎症因子水平。肝脏取出后称重,部分迅速分装-80℃保存,用于检测GSH、MDA和甘油三酯含量、实时定量PCR及蛋白免疫印迹分析;另外一部分分别用4%多聚甲醛固定和OCT包埋后制备石蜡切片和冰冻切片用于肝损伤以及肝脂肪变性评价。结果造模6周后,VDD组和EOH+VDD组小鼠血清25(OH)D浓度分别为13.32±0.81ng/ml和12.78±2.1ng/ml,显著低于Control组(55.34±2.59ng/ml)和EOH组(51.68±3.53ng/ml),同时酒精引起了明显的肝损伤以及肝脏脂肪变性。与正常对照组相比,单纯酒精组小鼠肝重和肝脏系数以及血清ALT、AST活性均明显升高;肝组织中Ki67核表达、TUNEL凋亡细胞数显著升高,并且肝组织病理切片可见大量脂质沉积,有不同程度的脂肪变性以及炎性细胞浸润;血清和肝组织中TG水平以及部分脂质转运相关基因的表达水平均升高;肝组织匀浆中GSH活性降低,MDA含量以及促炎因子TNFα和趋化因子MCP1、KC的m RNA水平均显著升高。与单纯酒精组相比,维生素D缺乏显著升高了小鼠肝脏系数和血清ALT、AST水平,而对肝细胞增殖和肝细胞凋亡以及肝组织脂肪病变程度无显著影响,对于油红O染色的阳性面积率和积分光密度值有升高的趋势,但差异无统计学意义;维生素D缺乏对血清和肝脏中TG含量以及脂质合成、转运相关基因的表达无影响,但进一步上调了肝脏脂质分解相关基因的m RNA水平;维生素D缺乏对肝脏GSH水平无影响,但升高了MDA含量加重了酒精诱导的脂质过氧化,同时显著增强了一氧化氮合酶的表达水平并明显下调了GSH-Px、SOD1和catalase抗氧化酶基因的表达水平;维生素D缺乏显著上调了促炎因子TNFα、IL1β和TGFβ以及趋化因子MCP1和KC的m RNA水平。结论单纯维生素D缺乏并非脂肪肝发病的直接危险因素,但维生素D缺乏加重了酒精诱导的肝损伤,其机制可能与维生素D缺乏促发氧化应激、释放炎性细胞因子和趋化因子诱导的肝脏炎症有关。