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[目的]调查大鼠脊髓全横断后miRNA的表达变化,筛查特异性变化miRNA。并在体外PC12、Hela细胞中查找特异性miRNA的靶蛋白。[方法]1、6只大鼠,随机分为假手术组（对照组）和脊髓全横断组（实验组）。术后3天取脊髓、肝脏提取总RNA,分离miRNA;2、用miRNA芯片miRCURYTMArray筛查对照、实验组脊髓和肝脏中miRNA表达变化,查找特异性miRNA;3、TargetScan靶基因预测软件结合蛋白组学结果确定miR-138的5个靶蛋白;4、免疫组织化学检测胸段正常脊髓组织中5个靶蛋白表达情况;5、PC12、Hela细胞分为3组,分别为正常细胞组（正常组）,单纯脂质体转染组（脂质体组）和miR-138转染组（miR-138组）。分别于转染24h、48h和72h后计数PC12、Hela各组细胞数;6、分别于转染24h、48h和72h后对PC12、Hela细胞各组进行MTT检测,计算miR-138的细胞抑制率;7、免疫组织化学检测PC12、Hela细胞各组靶蛋白表达变化,每组5个样本,测定阳性染色的光密度值;8、WesternBlot检测PC12、Hela细胞各组靶蛋白表达变化,每组5个样本,测定条带光密度值;9、RT-PCR检测PC12、Hela细胞各组靶基因mRNA表达变化,每组设8个样本,检测条带灰度值;10、所有的数据用SPSS 13.0软件进行分析。【结果]1、miRNA芯片筛查出在损伤脊髓组织中miR-138特异性表达减少;2、TargetScan靶基因预测软件共预测出343个靶基因,结合蛋白组学结果共确定5个靶靶蛋白,分别是β-突轴核蛋白（synuclein,beta;Sncb）,波形蛋白（vimentin;Vim）,原肌球蛋白4（tropomyosin 4;Tpm4）,电压依从性阴离子通道2（voltage-dependent anion channel 2:VDAC2）,神经营养性酪氨酸激酶2型受体（neurotrophic tyrosine kinase,receptor,type 2;NTRK2,TrkB）;3、免疫组化检测到胸段正常脊髓组织中Sncb、Vim、Tpm4、TrkB和VDAC2都有表达;4、与PC12细胞正常组比较,脂质体组在转染后48h（P=0.01）细胞数目减少;与脂质体组比较,miR-138组在24h（P=0.001）、48h（P=0.008）和72h（P=0.000）细胞数目减少。在Hela细胞,与正常组比较,脂质体组在转染后72h（P=0.009）细胞数目减少;与脂质体组比较,miR-138组在24h（P=0.711）、48h（P=0.417）和72h（P=0.408）细胞数目没有变化;4、MTT检测结果为与正常组比较,PC12脂质体组在48h（P=0.011）和72h（P=0.000）细胞增殖活力受到明显抑制;与脂质体组比较,miR-138组在72h（P=0.045）细胞增殖活力受到明显抑制。与正常组比较.Hela脂质体组在24h（P=0.01）和72h（P=0.008）细胞增殖活力受到抑制;与脂质体组比较,miR-138组在24h（P=0.022）和48h（P=0.022）细胞增殖活力受到促进,但在72h细胞增殖活力受到明显抑制。PC12在24h细胞抑制率为-6.29275%.48h为22.62443%,72h为22.11101%;Hela在24h细胞抑制率为-15.6846%,48h为-17.299%,72h为7.813765%;5、免疫组化检测到Tpm4和TrkB在PC12和Hela细胞中都表达,Vim仅在Hela细胞中表达。Scnb和VDAC2在两种细胞中都未检测到表达。Tpm4在胞浆中着色,TrkB在胞浆和核仁中显色,Vim在胞浆和突起中显色。光密度值分析显示Hela细胞miR-138组TrkB表达减少,其它靶蛋白没有变化;6、Wetern Blot在PC12细胞中检测到Tpm4、Sncb和VDAC2表达,Sncb表达减少;在Hela细胞中检测到Tpm4和VDAC2表达,VDAC2表达减少;8、RT-PCR在两种细胞中都检测到Vim、Tpm4和VDAC2 mRNA,永检测到Sncb和TrkB表达,miR-138组与对照组比较都没有变化。[结论】1、miR-138可能在脊髓损伤的进程中发挥重要作用;2、miR-138抑制PC12、Hela细胞的增殖;3、miR-138的靶蛋白可能为Sncb、VDAC2和TrkB:4、miR-138的调控方式可能为抑制mRNA翻译,但并不降解靶基因。