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目的 1.研究皮毛作业现场粉尘所致大鼠肺脏病理改变、皮毛粉尘是否可引起肺纤维增生及肺纤维性变程度如何。 2.进行皮毛加工环境空气中真菌污染状况及接尘工人呼吸系统损害的调查,并对抗真菌抗体进行测定,探明皮毛加工环境引起工人呼吸系统疾病的致病因子。 3.开展皮毛粉尘接触水平与肺功能损害的接触水平-反应关系研究,为修订皮毛粉尘卫生标准提供依据。 方法 (一)皮毛粉尘对大鼠肺纤维化作用的实验研究 1.粉尘来源:皮毛(羊毛)粉尘采自某皮毛厂缮缝、梳毛工序的工作面自然降尘,将粉尘剪碎,研磨备用。石英尘由中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所提供。 2.动物及分组:校实验动物中心提供的Wistar系大白鼠,体重180~220g,雌雄各半。随机分为生理盐水对照组、石英组、梳毛组、缮缝组。 3.染尘方法:动物经乙醚麻醉,采用气管内非暴露注入法染尘。除石英组为一次染尘40mg/ml外,其他各组均为染尘三次,每次间隔15天,第一次40mg/ml,后两次各为30mg/ml,总染尘剂量为100 mg。 4.实验时间及观察指标:动物染尘后1、3、6、12个月后分批处死,每组每次5~8只。开胸摘取肺脏及肺门淋巴结,观察形态改变。肺组织制成5μm切片,进行HE、Foot、VG染色,光镜下观察病理改变。对染尘后12个月的部分肺组织,制作超薄切片及扫描电镜标本,在JEM-1200透射电镜及TSMT-300型扫描电镜下观察。 病理取材后剩余组织经剪碎、脱脂、干燥、恒重测定全肺胶原含量。 (二)皮毛加工环境真菌污染状况及呼吸系统损害的调查 1.研究对象:选某皮毛加工厂接触皮毛粉尘,不接触毒物,无急性上呼吸道感染、肺结核、胸膜炎及器质性心肺疾病的138名工人为研究对象,其中男吸烟工人27名,平均年龄32.6岁,平均工龄3.1年;男不吸烟工人16名,平均年龄32.6岁,平均工龄为5.1年;女工(均不吸烟)95名,平均年龄30.6岁,平均工龄4.0年。另选劳动强度相似、不接触尘、毒的机加工工人40名作为对照,其中男吸烟工人12名,平均年龄31.8岁,男不吸烟工人8名,平均年龄32.3岁;女工(均不吸烟)20名,平均年龄30.1岁。 2.生产环境粉尘浓度、游离5102含量及真菌学调查:分别用滤膜增重法及焦磷酸质量法对皮毛加工各工序进行粉尘浓度及游离5102含量测定。采用自然沉降法(曝皿法)检测生产环境空气中的真菌污染情况。于车间四角及中央,在工人呼吸带水平(1一1.5m)放置平板,自然沉降5而n。选用沙保弱氏培养基,于25一28℃恒温箱中培养7d,菌落计数,计算每立方米中真菌数量。将真菌转种在察氏培养基和马铃薯葡萄糖培养基上,根据菌落形态,制片镜检,分离鉴定。 3.呼吸系统症状询问调查及X线胸片检查:采用呼吸系统症状询问调查表,对受检者逐个调查呼吸系统症状,同时记录职业史及吸烟史。选择呼吸系统症状明显者拍摄胸部正位X线片。胸片凡肺纹理正常或有轻度增强者为正常胸片,肺纹理增粗、增强及出现片状或条索状阴影者属异常胸片。 4.酶联免疫吸附试验(EllSA):对138名接尘工人及40名对照工人静脉抽血5耐。芽枝霉株和交链抱霉株于研钵中研磨,碳酸盐缓冲液(pH 9.6)中用超声波处理,40,0009离心10 min,上清液作为抗原液。抗原液分别包被96孔反应板,2.5%小牛血清白蛋白(BSA)封闭。待测血清稀释100倍,每孔100闪,每板设4孔为空白对照,篇温吸附。加羊抗人IgG一HRP,各孔加底物TMB(HZ 02/3,3’,5,5’一四甲基联苯胺),加50林1 ZmoUL硫酸终止液,阳性反应由蓝色变为桔黄色。反应板于Bio rad一450酶标仪读取吸光度OD45Onm值。 (三)皮毛加工工人粉尘接触水平与肺功能损害的关系 1.对象:对某皮毛厂接触皮毛粉尘1年以上,既往无器质性心肺疾病史,检查时无急性上呼吸道感染的212名男性工人进行了肺功能检测。另选劳动强度相似,不接触尘、毒的148名男性工人作为对照。接尘组工人的年龄为20一68岁,平均接尘工龄为17.0年。对照组工人年龄为20一66岁,平均工龄为16 .5年。接尘组与对照组工人吸烟率分别为66.0%与“.9%,两组吸烟工人的吸烟量分别为1 1.4、12.1包·年。 2.肺功能测定:用日本产sT一300型肺功能仪测定FVC、F’Ev,、vs。、V25等肺功能指标。以各项肺功能指标的预计值公式为基础,计算每名工人的预计值及实测值占预计值%。FvC、FEVI实测值小于预计值的80%,v50、V25实测值小于预计值的70%者定为异常。 3.粉尘浓度和累积接尘量:该厂1956年以来有较为完整的测尘资料,1956一1965,1966一1975,1976一1985,1986一1995年各主要工序所测得的粉尘浓度较为稳定,我们分别按上述4个时期计算1956年以来不同时期粉尘几何平均浓度。1956年前该厂生产、作业现场劳动条件与1956一1965年间基本相似,故以1956一1965年各主要工序的粉尘浓度推算1956年前各主要工序的粉尘浓度。 某工人累积接尘量(毫克·匀二艺Ci·Ti 式中Ci表示这一工人在某时期从事某工序时的平均粉尘浓度,Ti为这一