蔷薇藻光生物反应器培养及其胞外多糖的研究

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蔷薇藻(Rhodella reticulata)是一种海洋单细胞红藻,其生长过程中合成藻红蛋白、胞外多糖等生物活性物质,具有广阔的应用前景。目前,国外学者对蔷薇藻的胞外多糖、藻胆蛋白、光合系统等方面进行了一些研究,而国内有关蔷薇藻的研究还处于空白。为了充分利用海洋资源,本文对蔷薇藻的光生物反应器培养、蔷薇藻胞外多糖的分离纯化及其抗氧化活性进行了较系统的研究,得出如下研究结果:对引进的两株藻种进行分类鉴定,结果证实两株藻种均为蔷薇藻。采用均匀设计法对蔷薇藻的平板式光生物反应器培养条件进行研究,依据回归分析确定了最佳的培养条件:光照强度8 000 Lx、通气速率350 L·h-1、装液量7.5 L、接种密度2.3×106个·mL-1、pH 5.0。在最佳条件下,生物量和胞外多糖含量分别达2.93 g·L-1和495.28 mg·L-1。对蔷薇藻胞外多塘的提取工艺进行优化,醇析的最适乙醇浓度70%,胞外多糖粗品得率为85.2%,:果用Sevage法脱蛋白得白色多糖(EPS)。结合DEAE-SepharoseFast Flow离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶色谱柱层析,对提取得到的蔷薇藻胞外多糖进行分级纯化,得到三个级分:EPSⅠ、EPSⅡ和EPSⅢ,其含量分别为1.2%、37.8%和42.1%(相对于上样量),并鉴定为纯品。对蔷薇藻胞外多糖:多糖粗品、脱蛋白多糖、超声波处理多糖、变性多糖和分级纯化得到的各级分多糖进行抗氧化活性的比较。其中多糖粗品的抗氧化活性最高,经超声波处理、变性处理、脱蛋白和分级纯化等方式处理后的多糖的抗氧化活性有一定程度降低。
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