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目的检测乳化异氟醚(Emulsified isoflurane, El)静脉麻醉对成年雄性SD大鼠学习记忆能力及血浆皮质酮水平的影响。通过跳台实验、Morris水迷宫实验进行行为学观察;酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked Immunosorbent assay, ELISA)检测血浆皮质酮的含量,旨在探讨乳化异氟醚是否引起学习记忆能力及血浆皮质酮水平的变化,阐明乳化异氟醚是否与术后认知功能障碍(Postoperative cognitive dysfunction, POCD)有关。方法成年雄性SD大鼠(N=36),随机分为分为6组,空白组(n=6)、NS组(n=6)、EI组(n=6)、EI+Morris水迷宫组(n=6)、跳台实验组(n=6)、EI+跳台实验组(n=6)。(1)空白组为完全空白实验对照组,不做任何处理。(2)NS组不进行跳台实验和Morris水迷宫实验;于11:00-12:00尾静脉注射NS 1ml/kg。(3) EI组于11:00-12:00尾静脉注射8%EI(体积比)1 ml/kg。(4) EI+Morris水迷宫组进行水迷宫实验,首先进行Morris水迷宫定位航行实验训练,每天08:00-12:00训练,4次/天,共5天,进行行为学观察,记录定位航行实验逃避潜伏期时间。第5天Morris水迷宫定位航行实验训练结束后,10:00-11:00行Morris水迷宫空间搜索能力测试,记录空间搜索能力测试大鼠2min内在目标象限停留时间。实验过程中,保持环境安静以及水迷宫周围光源和物体位置固定不变。第5天Morris水迷宫空间搜索能力测试实验结束后,11:00-12:00,予尾静脉注射8%乳化异氟醚1 ml/kg即120mg/kg,麻醉苏醒后6小时在18:00-19:00,完成一次Morris水迷宫定位航行实验与空间搜索能力测试。(5)跳台实验组:于18:00-19:00进行跳台实验测试,跳台实验测试前24h进行跳台实验训练。(6)EI+跳台实验组于11:00-12:00,尾静脉注射8%乳化异氟醚1 ml/kg即120mg/kg,麻醉苏醒后6小时在18:00-19:00跳台实验测试;跳台实验测试前24h进行跳台实验训练。EI+Morris水迷宫组、EI+跳台实验组和单纯跳台实验组实验结束当天,NS组尾静脉注射NS当天、EI组尾静脉注射EI当天,空白组与EI组同一天,19:00-20:00,各组大鼠腹腔注射10%水合氯醛(0.4ml/100g)麻醉,取眼眶血2-3ml放入置于冰上的肝素管,0-4℃条件下4000r/min离心15min后取血浆。酶联免疫吸附测定法检测各组大鼠血浆皮质酮的含量。结果1. Morris水迷宫实验:①EI静脉注射前,Morris水迷宫定位航行实验训练逃避潜伏期(秒,x)第1至5天分别为42.04、22.79、11.08、13.29、10.96。EI静脉注射麻醉苏醒后6h, Morris水迷宫定位航行实验逃避潜伏期(秒,x)为12.66。EI静脉注射后麻醉苏醒后6h大鼠Morris水迷宫定位航行实验逃避潜伏期与EI静脉注射前大鼠Morris水迷宫定位航行实验训练逃避潜伏期第5天相比差异无统计学意义(P>0.05)。②EI静脉注射前Morris水迷宫空间搜索能力测试大鼠2min内在目标象限停留时间(秒,x)为46.15;EI静脉注射麻醉苏醒后6h大鼠Morris水迷宫空间搜索能力测试2min内在目标象限停留时间(秒,x)为43.63。EI静脉注射麻醉苏醒后6h大鼠Morris水迷宫空间搜索能力测试2min内在目标象限停留时间与EI静脉注射前相比差异无统计学意义(P>0.05)。2.跳台实验:EI+跳台组、单纯跳台对照组大鼠跳台实验潜伏期(秒,x)分别为221.83、184.66;跳台实验错误次数(x)分别为0.67、0.5。EI+跳台组大鼠跳下平台的潜伏期与单纯跳台对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),EI+跳台组大鼠5min内错误次数与单纯跳台对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。提示大鼠EI静脉麻醉后6h学习记忆能力无改变。3.酶联免疫吸附测定法检测血浆皮质酮含量结果:空白组、NS、EI、EI+跳台组、EI+水迷宫组、跳台组大鼠血浆皮质酮含量(ng,x)分别为102.00、169.21、117.51、205.35、179.55、200.22。空白组、NS、EI、EI+跳台组、EI+水迷宫组、跳台组皮质酮含量组间相比,EI+跳台组与空白组相比差异有统计学意义(P=0.038,P<0.05),跳台组与空白组差异有统计学意义(P=0.048,P<0.05); NS、EI、EI+水迷宫组与空白组相比差异无统计学意义(P>0.05); NS、EI、EI+跳台组、EI+水迷宫组、跳台组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。提示EI单次静脉麻醉后6h血浆皮质酮水平无明显变化;跳台实验后大鼠血浆皮质酮水平明显升高。NS、EI、EI+跳台组、EI+水迷宫组、跳台组组间相比差异无统计学意义,但NS、EI+跳台组、EI+水迷宫组、跳台组大鼠血浆皮质酮含量均值明显高于EI组,由此推测水迷宫实验、跳台实验、NS尾静脉注射可能是影响血浆皮质酮水平的潜在因素。结论在本实验条件下,可以得出以下结论:乳化异氟醚单次静脉麻醉后6h对大鼠学习记忆能力无明显影响;对大鼠血浆皮质酮水平无明显影响。目的检测乳化异氟醚静脉麻醉对成年雄性SD大鼠空间学习记忆能力的影响。通过Morris水迷宫实验进行行为学观察并记录定位航行实验逃避潜伏期、空间搜索能力测试在平台所在象限停留时间;旨在探讨乳化异氟醚是否引起空间学习记忆能力的变化,阐明乳化异氟醚是否与术后认知功能障碍(Postoperative cognitive dysfunction, POCD)有关。方法成年雄性SD大鼠(N=30),随机分为分为2组,NS组(n=6)、C组(N’=24,分C1、C2、C3、C4四亚组,n=6)。NS组为对照组;C组为实验组。各组大鼠进行Morris水迷宫定位航行实验训练,每天08:00-12:00训练,4次/天,共5天,进行行为学观察,记录定位航行实验逃避潜伏期时间。第5天Morris水迷宫定位航行实验训练结束后,10:00-11:00行Morris水迷宫空间搜索能力测试,记录空间搜索能力测试大鼠2min内在目标象限停留时间。实验过程中,保持环境安静以及水迷宫周围光源和物体位置固定不变。第5天Morris水迷宫定位航行实验训练结束后,11:00-12:00,NS组予尾静脉注射NS 1ml/kg, C组予尾静脉注射8%乳化异氟醚1ml/kg即120mg/kg。NS组静脉注射NS后6小时、C1组乳化异氟醚静脉麻醉苏醒后6小时、C2组麻醉苏醒后30h(24h+6h)、C3组麻醉苏醒后54 h(48h+6h))、C4组麻醉苏醒后78 h(72h+6h),在18:00-19:00,各完成一次Morris水迷宫定位航行实验与空间搜索能力测试。结果Morris水迷宫实验:1. Morris水迷宫定位航行实验逃避潜伏期:乳化异氟醚静脉麻醉前第1天至第5天Morris水迷宫定位航行实验训练逃避潜伏期(秒,x)分别为NS组45.20、21.42、18.88、17.96、14.63;C1组42.04、22.79、11.08、13.29、10.96;C2组48.29、14.00、13.50、18.71、11.38;C3组46.54、19.54、10.50、11.38、8.50;C4组51.83、26.33、20.46、12.58、11.50。乳化异氟醚静脉麻醉后Morris水迷宫定位航行实验逃避潜伏期(秒,x)NS、C1、C2、C3、C4组分别为21.42、12.66、11.23、17.62、16.07。乳化异氟醚静脉麻醉前,Morris水迷宫定位航行实验第1天至第5天NS、C1、C2、C3、C4组大鼠逃避潜伏期组间比较差异无统计学意义(P>0.05);NS、C1、C2、C3、C4组大鼠逃避潜伏期第2、3、4、5天与第1天组内比较差异均有统计学意义(P<0.05);NS、C1、C2、C3、C4组第2、3、4、5天大鼠逃避潜伏期组内比较差异均无统计学意义(P>0.05)。乳化异氟醚静脉麻醉后,C1、C2、C3、C4组分别于乳化异氟醚静脉麻醉苏醒后6h、30(24+6)h、54(48+6)h、78(72+6)h与NS组静脉注射NS后6h大鼠Morris水迷宫定位航行实验逃避潜伏期组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。NS组第5天静脉注射NS前与静脉注射NS后6h Morris水迷宫定位航行实验大鼠逃避潜伏期组内比较差异无统计学意义(P>0.05);C1、C2、C3、C4组第5天乳化异氟醚静脉麻醉前与乳化异氟醚静脉麻醉后Morris水迷宫定位航行实验大鼠逃避潜伏期组内比较差异无统计学意义(P>0.05)。2. Morris水迷宫实验空间搜索能力测试:Morris水迷宫实验空间搜索能力测试NS、Cl、C2、C3、C4组乳化异氟醚静脉麻醉前大鼠在目标象限停留时间(秒,x)分别为38.73、43.63、48.98、47.29、45.61;乳化异氟醚静脉麻醉后大鼠在目标象限停留时间(秒,x)分别为41.44、46.15、50.68、44.30、38.93。乳化异氟醚静脉麻醉前NS、C1、C2、C3、C4组Morris水迷宫实验空间搜索能力测试大鼠在目标象限停留时间组间比较差异无统计学意义(P>0.05);C1、C2、C3、C4组分别于乳化异氟醚静脉麻醉苏醒后6h、30(24+6)h、54(48+6)h、78(72+6)h,NS组静脉注射NS后6h Morris水迷宫实验空间搜索能力测试大鼠在目标象限停留时间组间比较差异无统计学意义(P>0.05);NS组第5天静脉注射NS前与静脉注射NS后6hMorris水迷宫空间搜索能力测试大鼠在目标象限停留时间组内比较差异无统计学意义(P>0.05);C1、C2、C3、C4组乳化异氟醚静脉麻醉前与乳化异氟醚静脉麻醉后Morris水迷宫实验空间搜索能力测试大鼠在目标象限停留时间组内比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论在本实验条件下,可以得出以下结论:乳化异氟醚单次静脉麻醉后6-78h对大鼠空间学习记忆能力无明显影响。