【摘 要】
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近二十年来，单克隆抗体已在医学基础研究和临床疾病的诊断等方面得到了广泛应用，但是由于使用的单抗多来源于啮齿类，应用于人体可导致免疫排斥反应，从而限制了单抗在疾病治疗中的
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近二十年来，单克隆抗体已在医学基础研究和临床疾病的诊断等方面得到了广泛应用，但是由于使用的单抗多来源于啮齿类，应用于人体可导致免疫排斥反应，从而限制了单抗在疾病治疗中的应用。临床应用价值高的人源性单抗在制备过程中又存在抗体产量低、不稳定、且多为IgM型等困难，至今尚无有效的解决方法。近十年来基因工程技术的发展给人们带来了希望。利用基因重组技术可对人单抗进行改造，抗体可变区基因克隆后可使其获得永生化(immortalize)，，并可在真核细胞或原核细胞中表达，得到与亲本抗体有同样抗原结合活性的基因工程抗体。 人-人杂交瘤细胞系87-2,可分泌抗肾综合症出血热病毒IgM(λ)型人单抗。本文从该杂交瘤细胞株提取细胞总RNA,以oligo-d(T)为引物反转录合成cDNA第一链。使用根据人抗体重链和λ轻链可变区5’端和3’端保守序列设计而人工合成的两对引物，以cDNA链为模板进行PCR扩增反应，将重、轻链可变区基因扩增产物插入M13噬菌体，经酶切鉴定，筛选到含抗体可变区基因的重组体，据此制备单链模板，用双脱氧链终止法，测出其核苷酸序列，所得DNA序列经计算机分析，轻、重链可变区基因全长分别为
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