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目的:探讨外源性硫化氢后处理的心肌保护作用与线粒体通透性转换孔的关系。
方法:采用大鼠Langendorff离体心脏灌注模型,雄性SD大鼠60只,随机分为5组,每组12只(n=12):空白对照组(CON)、缺血/再灌注组(I/R)、NaHS组(N)、苍术苷组(A)、NaHS+苍术苷组(N+A)。CON组持续灌注120min,其余各组均平衡灌注30min,全心缺血30min,复灌60min。其中,N组在复灌即刻给与含有浓度为10μmol·L-1NaHS的K-H液复灌15s,K-H液复灌15s,循环4次;A组复灌初10min给予含有20μmol·L-1苍术苷的K-H液灌注;N+A组复灌初同N组4次循环灌注,继之给予含苍术苷的K-H液灌注10min。记录各组平衡末(BS)、复灌10、30、60min(RP10、30、60min)时的心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)、左室压力上升或下降最大速率(±dp/dtmax),并检测复灌后冠脉漏出液中乳酸脱氢酶(LDH)和磷酸肌酸激酶(CK)的活力。复灌末各组取6个心脏行石蜡切片,HE染色观察组织形态学变化,TUNEL法检测心肌细胞凋亡率;另取6个心脏,采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法分析心肌梗死面积。
结果:平衡末各组间心功能指标差异未见统计学意义(P>0.05)。复灌各时间点,I/R组HR、LVSP、±dp/dtmax下降,LVEDP升高,LDH和CK活性增加,心肌梗死面积和心肌细胞凋亡指数增加(P<0.05,vs CON组)。N组较I/R组心功能指标明显改善,LDH和CK括性显著降低,心肌梗死面积和心肌细胞凋亡指数减少(P<0.05,vsI/R组),HE染色示心肌组织损伤较I/R组减轻。A组和N+A组HR减慢,LVSP和±dp/dtmax下降,LVEDP升高,CK和LDH活性增加,心肌梗死面积增加,心肌细胞凋亡指数增加(P<0.05,vs N组,),HE染色见心肌组织损伤与I/R组相似。
结论:外源性硫化氢后处理能减轻大鼠离体心肌缺血/再灌注损伤,该作用与其抑制线粒体通透性转换孔开放有关。