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目的：课题组前期通过双向电泳和质谱鉴定分离出在胃癌和癌旁正常黏膜组织有差异表达的蛋白质70种，其中43种蛋白质在胃癌中表达下降，其余27种蛋白质在胃癌中表达上升。本实验选择在胃癌中表达下降的ERp29蛋白进行进一步研究，旨在验证ERp29在胃癌组织中的低表达并探讨其表达与各临床病理参数之间的关系及其临床意义，并构建ERp29过表达载体，为后续的研究提供实验基础。方法：实验第一部分首先通过Western-blot及RT-PCR初步在蛋白质及mRNA水平检测ERp29在8对胃癌组织及相对应癌旁正常黏膜组织的表达情况。然后应用组织芯片技术结合免疫组化法对170对胃癌组织和癌旁正常黏膜组织中ERp29的表达水平进行检测，并分析其表达与年龄、性别、浸润深度、浆膜浸润、TNM分期、淋巴结转移、分化程度、血管侵犯、周围神经侵犯、组织学分型、肿瘤大小、远处转移及腹膜种植等临床病理之间的关系。实验第二部分运用基因克隆技术将ERp29的基因序列克隆至pcDNA3.1/Hygro（+）空载体中，构建ERp29-pcDNA3.1过表达载体，经酶切鉴定及测序鉴定正确后转染胃癌细胞SGC7901及AGS，并采用Western-blot检测转染前后胃癌细胞ERp29表达水平变化。结果：1.Western-bot结果：8对组织中有7对组织的ERp29蛋白在胃癌组织中表达下降，而另外1对标本ERp29在胃癌的表达水平则较高，结果分析显示ERp29在胃癌呈低表达具有统计学意义（p=0.032）。2.RT-PCR结果：检测的8对组织中， ERp29在胃癌组织的mRNA表达水平均明显低于癌旁正常黏膜组织的表达，差异具有显著统计学意义（P＜0.05）。3.组织芯片免疫组化结果：（1）、ERp29在胃癌组织的表达水平明显低于癌旁正常黏膜组织的表达，其阳性表达率分别为47.1%、85.3%，差异有显著性（P=0.001）。（2）、ERp29在胃癌中的表达与性别、淋巴结转移、TNM分期密切相关（P＜0.05），而与年龄、浸润深度、是否浆膜浸润、分化程度、血管侵犯、周围神经侵犯、组织学分型、肿瘤大小、腹膜种植及远处转移等临床病理参数无明显关系（P＞0.05）。（3）、ERp29在男性胃癌患者及女性胃癌患者的阳性表达率分别为53.6%和28.9%，差异具有显著意义（P=0.004），且其表达与TNM分期、是否淋巴结转移、淋巴结转移数目呈负相关关系（P值分别为0.006、0.027、0.002）。4.重组质粒ERp29-pcDNA3.1转染胃癌细胞后经western-blot验证，结果显示转染后胃癌细胞ERp29蛋白表达水平明显升高。结论：1.ERp29在胃癌组织呈低表达。2.ERp29是一个与胃癌淋巴结转移及TNM分期密切相关的潜在抑癌因子，在胃癌的发生、发展中起着重要的作用。3.成功构建ERp29过表达载体。