【摘 要】
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在拟南芥中存在一类钙调素B蛋白家族(calcineurin B-like proteins,CBL),它的靶蛋白是一类具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性的蛋白,被称为CIPK (CBL-interacting protein kinase)。
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在拟南芥中存在一类钙调素B蛋白家族(calcineurin B-like proteins,CBL),它的靶蛋白是一类具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性的蛋白,被称为CIPK (CBL-interacting protein kinase)。最近的研究表明,CBLs与CIPKs家族可能在植物对逆境应答的信号转导过程中起重要作用,但CIPK1基因在胁迫信号中的反应还未见报道。本研究从拟南芥中克隆CIPK1基因,并筛选其突变体,首次探讨了CIPK1在ABA(脱落酸)控制种子萌发信号途径中的作用,论文的具体研究结果如下:以持家基因β-actin作为内参,利用RT-PCR(逆转录PCR)检测拟南芥CIPK1基因在拟南芥不同器官中的表达,以及不同激素对此基因表达的调节。结果表明:CIPK1基因在拟南芥的根、茎、叶、花和果荚中均有表达,其中在茎和花中表达量最高,在叶中表达量最低;ABA处理1h,CIPK1基因的表达量达到最高峰;GA处理初期则抑制该基因的表达,处理2h后表达量逐渐恢复到未处理时的水平;2,4-D和6-BA处理也可使该基因表达量微弱增加;由此可以推断CIPK1基因的表达具有组织特异性,并且主要与ABA密切相关,与其它激素关系不大。为了更好的理解CIPK1基因在ABA信号传导中的作用,我们首先用Gateway的方法对CIPK1基因进行克隆,然后转化到野生型中,用Basta筛选3代后,得到了该基因表达量明显下降的共抑制转基因cipk1突变体;对ABA处理下野生型和突变体的萌发率进行测量,发现该突变体种子对ABA的敏感性下降,用0.2μM和0.4μmol/L ABA处理5天后,突变体种子的萌发率为76%和43%,而野生型为47%和10%。在ABA胁迫下cipk1突变体种子的萌发率明显高于野生型,表明CIPK1在ABA促进种子休眠的信号传导途径中起非常重要的作用。综上所述,ABA能诱导CIPK1基因的表达,并且可能通过CIPK1基因来调控种子休眠。这为进一步揭示ABA的信号传递途径和育种工作提供理论依据。
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