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目的:建立小干扰RNA(siRNA)抑制HePG2细胞galectin-1基因表达的实验条件,观察利用siRNA选择性抑制galectin-1基因表达对人肝癌细胞系HePG2生长、凋亡及迁移能力的影响。
方法:用RT-PCR技术检测siRNA对HePG2细胞galectin-1基因沉默的效率;用流式细胞术检测HePG2galectin-1基因沉默前后细胞凋亡率;以四甲基偶氮唑盐法(MTT)检测galectin-1基因沉默对HePG2细胞增殖的影响;用Millecell小室检测galectin-1基因沉默对HePG2细胞侵袭人工基底膜能力的影响。
结果:与空白对照组相比,转染48及72小时后人肝癌细胞系HePG2细胞中galectin-1基因表达水平明显下降(100%vs.15.7%,12.3%,p<0.01),HePG2细胞凋亡率明显上升(0 vs.22.5%,p<0.01),HePG2细胞增殖率显著下降(100%vs.57.2%,p<0.01),HePG2细胞的迁移能力明显受抑(100%vs.53.1%,p<0.01)。
结论:基于mRAN的siRNA干扰技术可以有效抑制galectin-1基因在人肝癌细胞系HePG2中的表达;galectin-1基因沉默对人肝癌细胞系HePG2的生物学行为具有明显的阻遏效应。由此推测,galectin-1基因表达在肝细胞癌的发生发展中起重要作用。