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目的:1.研究胰腺癌细胞株Panc02在γ干扰素(IFN-γ)作用下吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达及活性的变化以及1-甲基色氨酸(1-MT)对IDO活性的影响。2.观察在利用Panc02细胞株建立的胰腺癌荷瘤鼠中IDO的表达以及调节性T细胞(Treg)数量和功能的变化。3.观察在树突状细胞(DC)疫苗对胰腺癌荷瘤鼠中IDO的表达以及Treg数量和功能的影响。4.研究抑制IDO的活性后胰腺癌荷瘤鼠中Treg数量的变化以及对树突状细胞(DC)疫苗抗肿瘤作用的影响。方法:1.分别用不同浓度(0、10、20、50U/ml)的IFN-γ诱导刺激胰腺癌细胞株Panc02, Western Blot检测各组Panc02中IDO蛋白表达水平的变化。高压液相测定培养液中犬尿氨酸浓度评价IDO分子活性。2.建立小鼠胰腺癌模型,Western Blot检测荷瘤鼠肿瘤组织周围引流淋巴结(TDLNs)中IDO蛋白表达水平相对于正常对照组的变化。利用流式细胞术检测荷瘤鼠应用1-MT前后TDLNs及脾脏中CD4+CD25+T细胞占CD4+T比例;荧光定量PCR测量Foxp3在TDLNs及脾脏mRNA水平。3.利用肿瘤细胞裂解物冲击DC制备DC疫苗,并根据是否与1-MT联合应用分组,观测1-MT对免疫治疗在小鼠胰腺癌模型中抗肿瘤作用的影响,并测定TDLNs中IDO表达水平,同时研究TDLNs及脾脏中CD4+CD25+T细胞占CD4+T比例以及Foxp3 mRNA水平的变化。结果:1. Panc02中的IDO蛋白的相对表达量随着IFN-γ作用浓度的增大逐渐增高,同时活性增强,而1-MT可以有效抑制IDO的活性。2.胰腺癌荷瘤鼠TDLNs中IDO蛋白表达水平高于正常对照组。差异有统计学意义(p<0.05)。3.荷瘤鼠TDLNs和脾脏中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例明显高于正常对照鼠,同时Foxp3 mRNA表达水平显著提高。4.应用1-MT后,可以显著降低荷瘤鼠TDLNs和脾脏中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例。5.接受DC疫苗治疗的胰腺癌荷瘤鼠TDLNs中IDO表达增高,同时TDLNs和脾脏中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞的比例及Foxp3 mRNA表达水平显著提高。6.1-MT+与DC疫苗联合应用组肿瘤生长显著受到抑制,抗肿瘤作用显著高于DC疫苗组及1-MT组。结论:1.胰腺癌细胞株Panc02本身表达IDO,在IFN-γ诱导下表达上调且活性增强,这可能是引起TDLNs及脾脏CD4+CD25+Treg细胞的数量增加的重要因素之一。2.胰腺癌荷瘤鼠癌组织周围引流淋巴结IDO表达明显增高,且TDLNs及脾脏CD4+CD25+Treg细胞的数量增加,这可能是影响胰腺癌免疫治疗的重要因素。3.通过抑制IDO活性,1-MT可以有效抑制胰腺癌荷瘤鼠癌组织周围引流淋巴结及脾脏CD4+CD25+Treg细胞的数量增加,从而增强DC疫苗抗肿瘤作用。