颈交感神经离断在减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及机制

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背景缺血是脑卒中常见原因,而缺血再灌注导致的脑损伤是脑卒中患者临床预后差的主要原因。目前临床主要的治疗方法在急性中风处理中显示出劣势。星状神经节阻滞(Stellate Ganglion Block,SGB)已被广泛应用于多种临床疾病,近年来发挥了良好的疗效。大鼠颈交感神经干离断(Transection of the cervical sympathetic trunk,TCST)被认为是一种令人满意的模拟人类长期SGB的动物模型[1]。我们前期研究发现,TCST可减轻脑缺血再灌注(Cerebral ischemia/reperfusion injury,CI/R)损伤,但是其潜在的是机制是未知的。目的本研究旨在探究颈交感神经离断对脑缺血再灌注损伤的影响及机制。方法1.30只雄性SD大鼠随机分为三组:假手术组(Sham组),脑缺血再灌注组(I/R组),I/R组+TCST组(TCST组),每组10只。Sham组仅暴露血管,其余两组在大脑中动脉阻断90分钟后再灌注24小时,制作脑缺血再灌注模型,TCST组在再灌注后给予左侧交感神经离断。2.24小时应用改良的神经系统严重程度评分评估神经功能。3.神经功能评估后应用10%水合氯醛给予腹腔麻醉,迅速剪断其头部取出完整脑组织,2%TTC溶液测定脑组织梗死体积比。4.各组大鼠分别于再灌注后24 h水合氯醛麻醉后,腹主动脉采血2 ml,离心取上清后应用Elisa法检测TNF-α水平。5.各组大鼠再灌注24h后完整剥离脑组织,提取脑组织蛋白,应用Western blot实验检测TLR4、Caspase3、cleaved-caspase3、IL-6、IL-1β蛋白的表达,以GAPDH作为内参对照。结果1.Sham组大鼠神经功能正常,脑组织无梗死;与Sham组比较,I/R组神经功能评分增高,脑梗死体积增大(P<0.05);TCST组神经功能评分、脑梗死体积较I/R组降低(P<0.05)。2.Elisa分析发现血清炎症因子表达:与Sham组比较I/R组TNF-α表达升高(P<0.05);与I/R组比较,TCST组TNF-α表达降低(P<0.05)。3.Western blot实验分析蛋白表达情况:与Sham组比较I/R组TLR4、Caspase3、cleaved-caspase3、IL-6、IL-1β蛋白表达升高(P<0.05);与I/R组比较,TCST组TLR4、Caspase3、cleaved-caspase3、IL-6、IL-1β蛋白表达降低(P<0.05)。结论颈交感神经离断可减轻脑缺血再灌注损伤炎症反应和脑损伤,颈交感神经离断的保护作用可能与降低TLR4有关。
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