自由基能够参与调节生理代谢,但人体处于亚健康状态时,自由基异常累积会引发疾病。其中过氧亚硝酸根自由基(ONOO~-)具有多途径的强损伤能力,能够导致风湿性关节炎、败血症、帕金森症和癌症等多种疾病,且人体内缺少其特异性清除酶,因而有必要针对过氧亚硝酸根开发抑制剂。橙黄决明素、6-姜酚、大蒜素、甜菜碱及胡椒碱均是常见的天然抗氧化剂,深入研究五种天然抗氧化剂与自由基及人血清白蛋白(HSA)相互作用过程,有利于深入了解五种天然抗氧化剂在人体内的运输、代谢、分布以及抗氧化活性机理,对于进一步阐明常见天然抗氧化剂的活性机制及药用价值具有重要意义。本文通过荧光光谱法对比天然抗氧化剂抑制ONOO~-氧化损伤酪氨酸的能力,使用高效液相色谱法排除干扰,测定其抑制ONOO~-硝化损伤酪氨酸的能力,使用邻苯三酚自氧化法研究其对超氧根阴离子的清除能力,使用荧光光谱法及同步荧光光谱法研究对比几种天然抗氧化剂及ONOO~-与HSA的结合过程,并研究对比几种物质对ONOO~-直接损伤HSA的抑制能力。在橙黄决明素、胡椒碱、大蒜素、6-姜酚与维生素C(V_C)对超氧根阴离子的抑制研究中发现,橙黄决明素的抑制作用最强,而这些天然抗氧化剂对过氧亚硝酸根诱导的硝化和氧化损伤的抑制研究中,6-姜酚和胡椒碱抑制作用最为明显。在橙黄决明素、胡椒碱、大蒜素、6-姜酚及甜菜碱与HSA相互作用的研究中,甜菜碱无明显结合作用,其它四种天然抗氧化剂可通过疏水作用力与HSA结合,均有1个靠近色氨酸的结合位点,结合过程为自发的静态猝灭,结合能力胡椒碱>橙黄决明素>6-姜酚>大蒜素,并且四种天然抗氧化剂未对HSA构象造成明显影响。ONOO~-与HSA可通过氢键或范德华力结合,结合过程是自发发生的静态猝灭,具有1个接近色氨酸残基的结合位点,并且ONOO~-造成了HSA的损伤。橙黄决明素、6-姜酚、大蒜素、胡椒碱及甜菜碱在低浓度下均具有抑制ONOO~-直接损伤HSA的能力,抑制能力为大蒜素>胡椒碱>6-姜酚>橙黄决明素>V_C>甜菜碱。