鱼腥草指纹图谱研究及其中黄酮类成分分离制备

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鱼腥草为三白草科植物蕺菜(Houttuynia cordata Thunb.)的全草,具有清热解毒、消肿排脓、利尿通淋及止咳化痰等功效,同时对多种细菌有抑制作用。为了开拓其应用范围和对鱼腥草进行较全面的质量控制,本实验对其中的黄酮类物质进行分离纯化,以期为新药开发提供物质基础。同时应用不同的仪器分析手段建立了信息互补的鱼腥草HPLC-DAD和GC指纹图谱,以全面地反映出鱼腥草的化学组成特征。实验主要从以下两方面展开:一、对黄酮类化合物进行分离纯化(第二章)。实验采用有机溶剂萃取,硅胶柱层析,结合高效液相色谱,最后采用半制备液相色谱,对鱼腥草中的黄酮类化合物进行分离纯化,最终获得6个黄酮类物质的单体。通过与标准品对照及LC-MS数据进一步确定,鉴定了其中4个化合物,分别为槲皮苷、槲皮素、金丝桃苷、异槲皮苷,将色谱峰峰面积归一化,可以得出4种物质的纯度分别为98.31%、96.11%、99.25%、89.7%。二、建立了鱼腥草的]HPLC-DAD和GC指纹图谱(第三章和第四章)。鱼腥草广泛种植于各个地区,不同的地区,种植环境不同。而种植环境对其中的有效成分影响较大,从而导致鱼腥草的质量控制难以把握。因此,本实验一方面利用HPLC-DAD指纹图谱技术分析了全国12个主要产区的鱼腥草中非挥发性化学成分(第三章)。内容包括:提取条件和色谱分离条件的优化、方法学考察、相似度分析和主要活性成分的含量分析。结果表明不同产地鱼腥草非挥发性成分分布相似性较好,相似度均达到0.92以上,但主要活性成分含量差别较大。同时考察了不同存储时间对鱼腥草中非挥发性成分的影响,结果表明12个月内的鱼腥草非挥发性化学成分稳定,可以储存。另一方面用GC指纹图谱技术对7个产地的鱼腥草挥发性成分进行分析(第四章)。结合相似度评价方法和主要成分含量分析对7个产地的鱼腥草药材指纹图谱进行了较深入的研究。结果表明不同产地鱼腥草挥发性成分分布有一定相似性,但主要活性成分含量差别较大。挥发性成分分析与非挥发性成分分析结果吻合,均说明产地对有效成分含量影响较大。因此,用药时,对产地应予以重视。结合鱼腥草的HPLC-DAD指纹图谱和GC指纹图谱,可以较全面的控制鱼腥草的内在质量。
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