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目的:结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)是常见的消化道恶性肿瘤之一。随着人类生活水平提高,生活方式及膳食结构的改变,结直肠癌在全球的发病率和死亡率呈逐年上升趋势,严重危害着人类的健康。深入研究大肠癌的不同发生机制将对临床治疗有重要意义。
硫氧还蛋白相互作用蛋白(thioredoxin interaction protein,TXNIP)或硫氧还蛋白结合蛋白-2(thioredoxin binding protein-2,TBP-2),又称维生素D3上调蛋白1(vitamin D3-upregulated protein1,VDUP-1)最初发现于1,25-OH-维生素D3处理过的HL-60白血病细胞。它能够与硫氧还蛋白(thioredoxin,TRX)的活性部分结合,从而抑制其表达及活性。TRX/TXNIP系统在调节细胞内氧化还原状态中起着非常重要的作用。活性氧簇过多的产生或聚集引起氧化应激与癌症的病理和抗癌治疗密切相关。TXNIP在多种实体肿瘤(肝细胞肝癌、乳腺癌以及膀胱癌等)和血液恶性肿瘤中被认为是一种抑癌基因。然而,到目前为止,TXNIP表达与大肠癌的关系研究还未见报道。本研究着重观察TXNIP在大肠癌中的表达情况以及与Bcl-2表达的关系,同时比较二者与临床指标的关系。
方法:选取大肠癌标本45例作为实验组,25例正常大肠粘膜组织作为对照组。采用免疫组化学(SP法)、蛋白质免疫印迹(Western blot)检测了TXNIP和Bcl-2蛋白的表达并结合患者的性别、年龄、肿瘤部位、分化程度、有无淋巴结转移及浸润情况等临床病理因素进行综合分析。
结果:
1.免疫组织化学检测TXNIP和Bcl-2表达TXNIP蛋白在25例大肠正常粘膜中有21例阳性表达,其表达率为84%;在45例大肠腺癌组织中有12例阳性表达,其表达率为26.7%。经X2分析,TXNIP蛋白在正常大肠粘膜组织中阳性表达率显著高于大肠癌组织,差异具有统计学意义(P<0.01)。
Bcl-2在大肠正常粘膜和大肠腺癌组织中均有阳性表达。在25正常大肠粘膜组织中有4例阳性表达,其表达率为16%。在45例大肠腺癌组织中有26例阳性表达,其表达率为56.5%。经统计学分析,Bcl-2在大肠癌组织中的表达显著高于其在正常大肠粘膜中的表达,差异具有统计学意义(P<0.01)。
2.Western印迹检测TXNIP和Bcl-2表达在正常大肠粘膜组织的TXNIP蛋白相对表达强度显著高于大肠癌的表达强度,两者比较具有统计学意义(P<0.01)。Bcl-2蛋白在正常大肠粘膜组织中的相对表达强度则显著低于大肠癌组织的相对表达强度,经统计学检验,比较差异均显著(P<0.01)。
3.大肠癌组织中TXNIP蛋白表达与肿瘤临床病理特征之间的关系TXNIP在病理类型为高中分化的大肠腺癌组织中阳性表达率为56.3%,在低分化和未分化大肠癌组织中的表达率10.3%,二者差异具有统计学意义。TXNIP在有淋巴结转移的大肠腺癌组织中的阳性表达率为16.7%,在无淋巴结转移的大肠腺癌组织中阳性表达率为46.7%,二者差异具有统计学意义。TXNIP在未浸润浆膜的大肠癌组织中阳性表达率为36.8%,在有浸润浆膜的大肠癌组织中阳性表达率为19.2%,二者经统计学分析,差异具有统计学意义。TXNIP的表达与患者的性别、年龄、肿瘤所在部位无相关性。
4.大肠癌组织中Bcl-2蛋白表达与肿瘤临床病理特征之间的关系Bcl-2在高中分化、未浸润浆膜及无淋巴结转移的大肠癌组织中阳性表达率分别为37.5%、42.1%、33.3%,明显低于低未分化、浸润浆膜及有淋巴结转移的大肠癌组织中阳性表达69%、69.2%、70%,差异具有统计学意义。Bcl-2的表达与患者的性别、年龄、肿瘤所在部位无相关性。
5.TXNIP和Bcl-2在大肠癌表达中的相关关系采用相关分析表明,TXNIP蛋白与Bcl-2蛋白在大肠癌组织中表达呈负相关关系(P<0.01)。
结论:
1.大肠癌组织中TXNIP蛋白表达明显低于正常大肠粘膜组织中。TXNIP与大肠癌的分化程度、浸润深度以及淋巴结转移密切相关。TXNIP的表达与患者的性别、年龄、肿瘤所在部位无相关性。
2.Bcl-2蛋白正常大肠粘膜组织中为低表达,在大肠癌组织中为高表达。Bcl-2在高中分化、未浸润浆膜及无淋巴结转移的大肠癌组织中的表达情况明显低于低未分化、浸润浆膜及有淋巴结转移的大肠癌组织中阳性表达。Bcl-2的表达与患者的性别、年龄、肿瘤所在部位无相关性。
3.TXNIP在大肠癌中的表达与Bcl-2呈负相关。由此推测TXNIP可能在大肠癌的发生、发展过程中发挥重要作用。