鹿茸胶原多肽提取工艺及其护肤作用的研究

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鹿茸(Cervi Cornu Pantotrichum)是鹿科动物梅花鹿或马鹿的雄鹿未骨化密生绒毛的幼角,本论文对鹿茸胶原多肽的提取工艺及其护肤作用进行了探讨,为鹿茸的研究与利用提供参考。本文比较了盐法、酸法、酶解法及热浸渍法4种提取方法对鹿茸胶原蛋白提取率的影响。结果表明,酶解法的提取率最高,可以达到72.74%。进而研究了酶种类对胶原蛋白提取率的影响。研究结果表明,胃蛋白酶酶解后的提取率最高。基于以上结果,说明提取方法和酶种类都会影响鹿茸胶原蛋白提取率。本文采用响应面试验设计,分别优化了碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解法提取鹿茸胶原多肽的工艺条件,并进一步对复合酶酶解工艺和酶解产物的分子量进行探讨。通过软件Design-Expert求解方程得出碱性蛋白酶最优酶解条件为:酶解时间3.6 h、pH值10.5、酶解温度55℃、加酶量4%,胶原蛋白最大水解度为22.03%;胰蛋白酶最优酶解条件为:酶解时间3.2 h、pH值8.0、酶解温度50℃、加酶量4.4%,胶原蛋白最大水解度为15.81%。复合酶的酶解条件为:酶解温度为52.5℃,调节pH值为10.5,加入4%的碱性蛋白酶酶解3.6 h;调节pH值至8.0,加入4.4%的胰蛋白酶酶解3.2 h,所得酶解液的水解度为33.42%。鹿茸胶原多肽分子量分布在400~1400 Da之间。说明复合酶酶解能够有效提高胶原蛋白的水解度,其组合方式对水解度有较大影响。本文采用重量法测定了鹿茸胶原多肽的保湿性,采用分光光度法测定了鹿茸胶原多肽的抗氧化性和对酪氨酸酶活性的抑制作用。研究发现,15%的鹿茸胶原多肽保湿性最强;50 mg/mL的胶原多肽溶液对DPPH·的清除力为75.6%,对OH·的清除率为80.3%,对Fe3+的还原力吸光度值为1.133,对酪氨酸酶活性的抑制率为42.7%。提示鹿茸胶原多肽具有出较好的保湿性能和抗氧化活性,并且对酪氨酸酶活性具有较好的抑制效果,具有较好的护肤作用。本文对鹿茸胶原多肽对衰老小鼠皮肤的护肤效果进行了研究。综合分析表明,涂抹鹿茸胶原多肽水溶液6周能有效提高衰老皮肤水分、HA和羟脯氨酸含量,显著增加皮肤中SOD和GSH-Px的活性及抑制MDA水平。通过观察小鼠皮肤表观特征,发现鹿茸胶原多肽还能改善皮肤粗糙、松弛、皱纹等现象。进一步证实了鹿茸胶原多肽对衰老皮肤有良好的保湿护肤效果。
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