【摘 要】
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为解决雄性表型性别反转母鸡输精管的后半部发育不完全,针对离体睾丸精子、鸡精液量较少的实验鸡受精问题,尝试建立鸡腹腔镜人工授精方法。本实验通过选择合适的麻醉方法,开展鸡精液冷冻,比较鲜精和冷冻-复苏精子在腹腔镜人工授精方法和泄殖腔人工授精鸡胚的受精和孵化效率,研究鸡腹腔镜人工授精方法的可行性。本实验结果如下:（1）鸡睾丸组织的剪切、研磨和切开操作对获取鸡精液量差异不显著,睾丸组织研磨法可获取较多精子
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为解决雄性表型性别反转母鸡输精管的后半部发育不完全,针对离体睾丸精子、鸡精液量较少的实验鸡受精问题,尝试建立鸡腹腔镜人工授精方法。本实验通过选择合适的麻醉方法,开展鸡精液冷冻,比较鲜精和冷冻-复苏精子在腹腔镜人工授精方法和泄殖腔人工授精鸡胚的受精和孵化效率,研究鸡腹腔镜人工授精方法的可行性。本实验结果如下:（1）鸡睾丸组织的剪切、研磨和切开操作对获取鸡精液量差异不显著,睾丸组织研磨法可获取较多精子。（2）对比肌肉注射麻醉和翅下静脉速眠新麻醉药后,记录6天连续产蛋情况,结果两组数据差异不显著（P>0.05）,但翅下静脉注射后,实验鸡应激较小,产蛋率较高,故选用翅下静脉注射麻醉药。（3）对TL-HEPES、格林试剂、BPSE和TTE四种精液稀释液在37℃恒温条件下对鸡精子保存的比较,结果在37℃下保存30 min后,BPSE中精子存活率相比TL-HEPES和格林试剂显著降低（P<0.05）,与TTE相比精子存活率差异极显著（P<0.01）,并且在120 min后BPSE中精子存活率相比TL-HEPES和格林试剂差异极显著（P<0.01）,TTE和TL-HEPES保存精子活率差异不显著,但是TTE比TL-HEPES作为稀释剂对该实验公鸡精子效果较好。（4）TTE作为稀释液,比较甘油,DMSO和丙二醇冷冻保护鸡精子存活率,结果表明DMSO优于丙二醇（P<0.05）,甘油优于丙二醇（P<0.01）,甘油和DMSO差异不显著,但是甘油作为该实验公鸡精子冷冻保护剂效果较好。（5）以甘油和TTE作为冷冻保护剂,结果表明在液氮面上5 cm时精液冷冻平衡时间以10～30 min冷冻,其解冻后精子存活率较高,平衡15 min效果最好。（6）比较采集的鲜精、鲜精冻精和睾丸精子通过泄殖腔和腹腔镜人工授精的鸡胚受精率、孵化率和出雏率,在2.0×10~7左右精液量时,鲜精和睾丸取精的精子通过泄殖腔和腹腔镜人工授精出雏率差异均不显著;鲜精的腹腔镜授精与泄殖腔人工授精差异不显著,冻精和睾丸精液的腹腔镜人工授精的结果略优于泄殖腔人工授精。本研究成功建立了腹腔镜介导的鸡的人工授精方法。
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