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热休克蛋白60(hsp60)广泛存在于生物体内,它的基本功能是参与蛋白质的折叠、转运、代谢等。目前,hsp60研究的重点是在感染、肿瘤及风湿性疾病等方面的作用及机制,而其关于白色念珠菌(Candida albicans)感染的预防或治疗性疫苗方面的研究未见报道。由于hsp60进化高度保守性和在炎症过程中的过度表达,使其成为宿主免疫系统识别的重要免疫原,也成为真菌疫苗研究的一个重要靶点。本研究旨在借助动物实验,评价通过基因工程表达的白色念珠菌hsp60融合蛋白的免疫保护作用,并初步探讨其作用机制,为开发真菌疫苗奠定实验基础和提供理论根据。根据GenBank中,白色念珠菌hsp60的基因序列设计引物,通过RT-PCR技术扩增其基因片段;将PCR产物连接到pET28b(+)表达质粒中,构建pET28b-hsp60重组表达载体;并将其转入大肠杆菌BL21中诱导表达;按照常规方法完成通过SDS-PAGE及Western blot鉴定表达蛋白的正确性;经Ni2+-Saphrose-4金属螯合亲和层析法纯化融合蛋白质。将重组hsp60蛋白免疫小鼠,通过ELISA检测小鼠血清中抗体效价;淋巴细胞转化试验检测T淋巴细胞增殖水平;用该菌株的致死量攻击免疫小鼠,取肾脏进行菌落记数,并用非致死量攻击免疫小鼠,观察二个月内的存活率,来评价保护效果。本研究成功表达了重组hsp60蛋白,并通过免疫小鼠,发现小鼠产生了保护性的特异性体液免疫应答和细胞免疫应答。动物保护试验结果表明:该重组蛋白免疫后的小鼠对白色念珠菌的攻击具有明显的保护作用。本研究初步探讨了白色念珠菌hsp60蛋白的免疫活性,为开发白色念珠菌疫苗奠定了理论基础。