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吉祥草为百合科植物吉祥草(Reineckia carnea(Andr.) Kunth.)的全草,是《贵州省中药材、民族药材质量标准》2003年版收载品种。以全草入药,全年可采收,用于肺结核,咳嗽咯血,慢性支气管炎,哮喘,风湿性关节炎;外用治跌打损伤,骨折等。近年来国内外对吉祥草的报道主要是其化学成分方面的研究,研究证明吉祥草主要含有甾体皂苷类,皂苷元等成分,其中皂苷类成分主要包括以凯提皂苷元等为非糖部分的多种甾体皂苷。但目前有关吉祥草质量标准的研究除了其氯仿提取部位的薄层鉴别研究外,其质量控制方面的研究相对较少。作为贵州的常用苗药,吉祥草的各种制剂在临床上已取得较好疗效。由于中药化学成分复杂,且原药材由于不同产地、不同采收期等原因,使其质量稳定性受到影响,所以为了使吉祥草药材得到进一步的开发和利用,有必要对吉祥草药材进行系统的质量控制。因此,本课题通过现代分析手段对吉祥草药材的质量评价体系进行较为系统研究,研究分为以下的部分: 第一部分:吉祥草薄层色谱鉴别 首次建立了吉祥草有效成分薄层色谱鉴别的方法,并对10批来自不同产地吉祥草药材进行鉴别。 第二部分:吉祥草中总皂苷的含量测定 药理研究显示吉祥草中总皂苷具有一定止咳、化痰、抗炎的作用,因此,测定吉祥草中总皂苷的含量对评价吉祥草药材质量具有重要意义。本部分首次采用紫外分光光度法对吉祥草中总皂苷的含量进行测定。吉祥草中总皂苷质量在26~136 ug,γ=0.9996,范围内线性关系良好,方法的平均回收率为97.34%,RSD=1.6%(n=9),同时,比较出各不同产地吉祥草中化学成分的含量差别,不同来源的吉祥草药材中总皂苷含量有较大差异,为制定吉祥草的质量标准提供有用依据。 第三部分:不同产地吉祥草指标性化学成分的含量测定及比较 首次采用高效液相色谱(HPLC)-蒸发光散射检测器(ELSD)为检测手段对吉祥草中有效成分皂苷元凯提皂苷元进行含量测定,吉祥草中主要含有甾体皂苷类,皂苷元等活性成分,其中凯提皂苷元对环腺苷酸磷酸二酯酶的活性有抑制作用,因此,将凯提皂苷元作为指标成分,对吉祥草的质量控制具有重要意义。凯提皂苷元质量在5~30μg之间线性关系良好,γ=0.9993,平均回收率为98.04%,RSD=2.6%(n=9)同时,对不同产地的吉祥草中的指标性成分进行含量测定,为建立吉祥草药材科学合理的质量控制方法和实现其规范化种植提供理论依据。 第四部分:吉祥草指纹图谱的研究 本部分首次对吉祥草药材采用HPLC-ELSD建立化学指纹图谱方法,并对13批来自全国各地的样品进行了指纹图谱分析,其中贵州地区样品之间的相似度大于0.9,其余各地样品与贵州地区样品的差异主要表现在指纹图谱的各峰的峰形及相对高度上,导致相似度较低,说明了吉祥草化学成分受地区差异影响明显,通过对吉祥草高效液相指纹图谱的分析找出吉祥草特有的指纹特征,以此来对吉祥草真伪优劣进行鉴别和评价。 第五部分:吉祥草药材中重金属元素的含量测定与一般质量检查 本部分采用原子荧光光度法和原子吸收分光光度法测定了吉祥草药材中的Pb、Cd、Hg、As、Cu五种重金属元素,其回收率为95.81%~100.52%之间,RSD<3%。结果表明,吉祥草中含有Pb、Cd、Hg、As、Cu等重金属元素,其中,贵州地区吉祥草中Cu含量均大于20 ppm,临床使用必须高度重视。中药的一般质量检查也非常重要,因为中药的一般质量直接关系到中药的疗效,中药的储存过程对中药的一般质量要求相当严格。因此,中药的一般质量研究在中药的质量控制过程中是必不可少的。对本部分的一般质量研究包括:水分测定、浸出物测定、总灰分测定、酸不溶性灰分的测定。