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本论文主要研究二、三维培养模式下,添加不同浓度的油酸、亚油酸、亚麻酸以及三者不同浓度配比对BMECs乳脂肪和乳蛋白合成的影响,旨在探寻促进乳脂肪和乳蛋白合成的适宜十八碳不饱和脂肪酸供给模式,为改善牛奶品质提供科学依据。本论文包括两部分试验内容。第一部分研究二维培养模式下,添加不同浓度的油酸(0μmol/L、50μmol/L、100μmol/L.200μmol/L、400μmol/L)、亚油酸0μmol/L、 20μmo1/L、40μmol/L、80μmol/L、120μmol/L)、亚麻酸(0μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L、 2μmol/L、4μmol/L)及三者不同浓度配比(2：13.3：1、9.6：7.4:1、17.2：1.4：1)对BMECs活力、胞内TAG含量、乳脂肪和乳蛋白合成相关基因表达的影响,为三维培养模式下脂肪酸的添加浓度提供参考。本论文第二部分研究三维培养模式下添加油酸(0μmol/L、80μmol/L、100μmol/L)、亚油酸(0μmol/L、40μmol/L、80μmol/L)、亚麻酸(0μmol/L、0.5μmol/L、1μmol/L)及三者不同浓度配比(2:13.3:1)对BMECs培养液中TAG的含量、乳脂肪和乳蛋白合成相关基因表达的影响。试验结果表明：(1)100μmol/L口200μmol/L的油酸显著提高了胞内TAG的合成量(P<0.05)。添加油酸上调了DGAT2基因的表达,显著抑制了SCD、FABP3和SREBF1基因的表达(P<0.05)。添力50μmol/L的油酸,STAT5、mTOR、AKT和4EBP1基因表达量高于对照组。添加200μmol/L和400μmol/L的油酸抑制了CSN3、CSN1S1、STAT5、 mTOR、4EBP1和AKT的表达。(2)添加40μmol/L和80μmol/L亚油酸,BMECs中TAG的合成量显著高于对照组(P<0.05)。添加20μmol/L-80μmol/L的亚油酸上调了DGAT2的表达。20μmol/L-120μmol/L的亚油酸显著下调ACACA、FASN和SREBF1的基因表达(P<0.05)。添加20μmol/L亚油酸显著上调CSN1S1、CSN3、STAT5和mTOR基因的表达(P<0.05)。(3)添加05-2μmol/L的亚麻酸,能够促进BMECs胞内TAG的生成。0.5μmol/L亚麻酸添加组ACACA和FASN的表达量高于对照组；1μmol/L的亚麻酸显著促进了DGAT2的基因表达(P<0.05)。0.5-2μmol/L亚麻酸上调了STAT5和mTOR的表达水平。(4)油酸、亚油酸和亚麻酸三者配比为2：13.3：1和9.6：7.4：1的处理组显著促进了胞内TAG的合成量(P<0.05)。混合添加油酸、亚油酸和亚麻酸都下调了FASN、 SCD、FABP3和SREBF1的表达(P<0.05),显著促进了DGAT2的表达(P<0.05)。油酸、亚油酸和亚麻酸三者配比为2：13.3：1的混合添加组显著促进了CSN1S1、 CSN3、STAT5、mTOR和4EBP1的基因表达(P<0.05)。(5)添加Oμmol/L、80μmol/L和100μmol/L的油酸,三维细胞培养液中TAG的含量高于二维培养液。80μmol/L和100μmol/L的油酸显著上调了ACACA、 DGAT2和PPARG的表达(P<0.05)。添加100μmol/L的油酸上调了SREBF1的表达量(P<0.05)。添加油酸促进了CSN1S、CSN3、STAT5和PRS6K1的表达。(6)三维培养模式下,0μmol/L、40μmol/L和80μmol/L的亚油酸处理组,BMECs中TAG合成量显著高于二维培养模式(P<0.05)。添加40μmol/L亚油酸上调了DGAT2和PPARG的表达。80μmol/L亚油酸促进了CSN3、mTOR和4EBP1的表达。(7)三维培养条件下,亚麻酸处理组(0μmol/L、0.5μmol/L和1μmol/L)BMECs培养液中TAG合成量均高于二维培养。与对照组相比,添加0.5μmol/L的亚麻酸显著提高了DGAT2和PPARG的表达(P<0.05)。添加0.5μmol/L和1μmol/L的亚麻酸显著上调了STAT5、mTOR、4EBP1和PRS6 K1的表达(P<0.05)。(8)三维模式下混合配比组(2：13.3：1)培养液中TAG含量显著高于二维培养(P<0.05)。三维培养模式下油酸、亚油酸和亚麻酸的比例为2：13.3：1的混合添加组显著上调了DGAT2、PPARG、CSN3、STAT5、mTOR和AKT的表达(P<0.05)。综合上述结果,二维培养模式下添加50～100μmol/L的油酸促进了乳脂肪合成,100μmol/L的油酸显著抑制了CSN3的表达。80μmol/L的亚油酸对乳脂肪合成有较好的促进效果,但显著抑制CSN1S1和CSN3的表达。0.5～1μmol/L的亚麻酸以及混合添加2：13.3：1的油酸、亚油酸和亚麻酸对乳脂肪和乳蛋白合成有较好的促进效果。三维培养模式下,100μmol/L的油酸、80μmol/L的亚油酸、1μmol/L的亚麻酸和2：13.3：1的十八碳不饱和脂肪酸混合添加对乳脂肪和乳蛋白合成有较好的促进效果。三维细胞培养条件下添加油酸、亚油酸、亚麻酸及三者不同配比,BMECs中TAG合成量及乳脂肪和乳蛋白合成基因的表达均高于二维培养模式。