根癌农杆菌介导的Bt与GNA基因转化菊花品种的研究

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通过该研究,获得的结果如下:⒈建立菊花9个品种高效稳定的再生体系以9个菊花品种为试材,利用6种分化培养基和3种生根培养基,以叶片、节间茎段为外植体,研究不同基因型、激素组合以及附加不同浓度的AgNO<,3>对建立高效、快速、经济的再生体系建立的影响.⒉建立菊花品种日本黄农杆菌介导的遗传转化体系以菊花品种日本黄为材料,取节间外植体,在分化培养基D<,5>(MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L,pH6.0)上预培养2d.将节间外植体在含GUS基因的pBⅠ121的根癌农杆菌菌液中浸泡10min后,在共培养培养基C<,1>(1/2MS+NAA0.5mg/L,pH5.6)上暗培养2天,保持温度为23℃.⒊转Bt基因菊花抗虫植株的获得在国内首次用转Bt的CrylAc基因获得菊花的抗虫植株.以茎节间段为外植体用农杆菌介导法,将苏云金芽孢杆菌(Bt)毒蛋白CrylAc基因导入菊花(切花菊)品种日本黄中,得到126株健康抗性植株,通过PCR初选,阳性植株进行基因组DNA的Southern杂交证明CrylAc基因已整合到菊花基因组中,共获得6株转基因植株,转化率为4.8﹪.⒋转雪花莲外源凝集素基因(GNA)菊花抗菊姬(小)长管蚜我们首次转GNA(Galanthus navies agglutinin,snowdrop)基因获得菊花的抗菊姬(小)长管蚜(Macrosiphoniella sanborni)植株.
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