OsGA20ox2基因沉默降低水稻株高的研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:crazyasp
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
20世纪60年代在农作物研究上掀起了一场绿色革命,水稻OsGA20ox2基因的突变产生水稻半矮化品种。这些矮化突变体不仅抗倒伏,而且提高了粮食产量,解决了由人口增长引发粮食缺乏的问题。这些水稻半矮化品种目前仍被应用到农业生产中。水稻是最重要的农作物之一。有些水稻品种如QX1农艺性状好,包括高产、正常开花、可育、品质优良等,但是在雨多风大的某些地区不能大面积推广种植,主要是株高过高,易倒伏,给生产收获带来不便。所以,适当降低株高且不影响其他重要农艺性状,是非常必要的。在现有优良品种的基础上,利用分子遗传学方法来改良作物品种的特定农艺性状如株高,是一种可行的捷径。RNAi技术能够特定抑制靶基因的表达。本研究通过RNAi技术,下调OsGA20ox2基因的表达,导致水稻植株矮化,而不影响其他农艺性状,取得以下结果:1.基于OsGA20ox2核苷酸序列,以水稻粳稻品种QX1基因组DNA为模板,通过PCR扩增3个特异片断,分别作为RNAi的3个干涉区段。它们分别包括OsGA20ox2基因的外显子1、外显子2和外显子(?),干涉区段长度分别为597 bp、531 bp和990bp。将上述片段连接到中间载体pTCK303上,分别构建正向连接载体、反向连接载体和发夹RNAi载体,共构建了9个表达载体。2.通过根癌农杆菌EHA105介导法,将9个表达载体遗传转化4个水稻品种QX1、中作8923、中作0114和中作0201,共得到转基因植株1215株,其中矮化植株为465株。3个发夹载体pCH1CK(干涉区段为597 bp)、pCH2CK(干涉区段为531 bp)、pCH12CK(干涉区段为990 bp)的矮化效率依次为25%、29%、36%,他们的矮化植株经2个世代分离,遗传稳定性好。3.对中作8923/pCH2CK的矮化植株生物学性状进行分析,结果显示矮化植株株高降低到对照的53%~58%,矮化植株各个节间长度比对照缩短。对于受体QX1和中作0201来说,发夹载体pCH1CK和pCH12CK都获得了矮化植株,其中pCH1CK的矮化植株株高是对照的70%~84%,pCH12CK为62%~70%,由此推出随着干涉片段的增加,矮化程度加重。所获得的转基因矮化植株与对照相比,开花正常、可育,产量保持稳定。4.通过Southern blot分析,表明矮化植株有外源片断插入水稻基因组中,有单拷贝、2拷贝或多拷贝插入。RNAi矮化植株的RT-PCR和Northern blot分析结果表明OsGA20ox2基因在矮化植株中的表达与对照相比,明显下降;RT-PCR结果显示其它3个OsGA20oxs基因包括OsGA20ox1、OsGA20ox3和OsGA20ox4在水稻矮化植株和对照中的表达基本一致。5.对部分RNAi矮化植株的T2代幼苗外施不同浓度GA3,可促进水稻第二叶鞘延伸。其中浓度为10μM GA3连续处理幼苗5天,矮化植株幼苗可恢复对照的株高。以上结果表明矮化植株对外源生物活性GA3有反应。6.通过GC-MS法测量部分RNAi矮化植株幼苗内源GA含量,表明矮化植株中内源生物活性GA1含量下降到对照的32%~56%。以上结果可能是OsGA20ox2基因的下调影响了GA代谢途径,导致其下游生物活性GA含量降低。7.本研究中应用RNAi技术下调OsGA20ox2基因的表达,降低了水稻株高性状。但是不影响其他重要农艺性状,如产量、开花和育性等,避免了传统育种的长期性和繁琐性。表明RNAi技术可以有效调节水稻株高性状,是研究植物功能基因组学的重要工具之一。
其他文献
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
据中国执行信息公开网披露,日前,上海市第一中级人民法院将金嗓子控股集团有限公司的子公司——金嗓子食品列入失信被执行人名单,失信被执行人行为具体情形是:有履行能力而拒不履行生效法律文书确定义务。  提及金嗓子,几乎家喻户晓,当年足球明星罗纳尔多应金嗓子董事长江佩珍之邀吃饭,饭前要求穿着球衣,手拿金嗓子喉宝说一句广告词“金嗓子喉片,广西金嗓子”,报酬是30万元,又吃饭又给钱,真是天上掉馅饼。随后,罗纳
如何让慈善不只是一次事件,让捐赠人切实体会到捐赠的意义,确保慈善资金供应充足,在当代互联网背景下,以互联网+教育为出发点,力求探寻一种既能为企业带来经济效益又能保证慈善资金
水泥生产技术发展趋势国家建材局技术情报研究所乔龄山一、煅烧技术及设备的新进展不论我国还是其他国家,煅烧技术与热经济在目前和今后一段时期内都是水泥设备与工艺改革的中
建材商品市场现状及有关问题探讨苏纶本文所指建材商品市场(以下简称建材市场)指有形现货市场,包括以场地、设施、管理性服务性劳务为手段,通过招商设摊的形式,集中生产企业、流通
国有建材企业亏损情况调查分析国家建材局副局长黄书谋在推进社会主义市场经济体制建立和完善过程中,提高国有企业经济效益,减少亏损,不断地增强国有企业活力,一直是全社会关注的
<正> 在应试教育视野里,班主任工作具有边缘性特征,其岗位具有业余性特点,这使班主任在强化“管制”职能之外,其他职能的改造处于随意状态。而创新教育视野里的“班主任”,在
贵州以喀斯特岩溶地貌为主,沟壑纵横,深谷密布,独显&#39;一山有四季,十里不同天&#39;的山地气候特点。随脱贫攻坚强劲推进,贫困村优选香菇栽培,但合作社栽培香菇收益迥异。笔
从9世纪中叶吐蕃王朝崩溃到13世纪中叶元朝统一以前的西藏,学界一般将其称之为分治割据时期或分裂割据时期,这是就西藏地方政治而言。至于这一时期的文化特征,学界鲜有讨论。
本文从河南地区各院校发展概况、二胡演奏代表人物等方面对河南二胡艺术的发展状况进行概述,紧接着又从声腔特点、戏曲风格、民间器乐演奏手法、时代性等方面分别阐述了河南