蜂胶中脂溶性活性成分的研究

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蜂胶是由蜜蜂的工蜂将采白杨树、柳树、松树等植物的幼芽和愈伤组织分泌的树脂状物质与自身的消化腺和蜡腺等腺体的分泌物混合之后形成的一种具有黏性的天然混合物。是一种中药,具有抗菌、消炎、抗真菌、抗病毒、增强免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、清除自由基、抗辐射、促进组织再生、降血脂等作用。由于蜂胶具有多种保健和辅助治疗功能,近年来,在全球范围内引起广泛关注。本论文主要对蜂胶中脂溶性有效成分的提取、分离、成分分析、新型蜂胶软胶囊的试制进行了研究,主要实验结果如下:采用传统溶剂法和超临界CO2萃取法对蜂胶有效成分进行提取。溶剂法提取蜂胶的最佳工艺条件为:提取温度70℃、固液比1:6.5、萃取时间8小时、乙醇浓度90%,萃取率为62.5%。用单一的CO2做溶剂,对脱蜡后蜂胶进行超临界CO2萃取,中试最佳萃取工艺条件为:萃取压力30Mpa,萃取温度55℃,CO2流量200kg/h,萃取时间4小时,萃取率为15.5%~21.5%。采用超临界CO2萃取蜂胶同样的操作条件对脱蜡后胶渣有效成分进行中试萃取,萃取率为,33.75%~46.25%。通过实验研究,将两种提取工艺有机结合起来,可使珍贵的蜂胶资源得到充分利用。采用国标HPLC法测得蜂胶、胶渣超临界CO2萃取物的总黄酮含量分别为6736.78mg/100g和2903.44mg/100g,采用分光光度法测得蜂胶、胶渣超临界CO2萃取物的总黄酮含量分别为6900.44mg/100g和2903.43mg/100g,两种分析方法的测定结果基本一致。采用GC/MS检测到蜂胶超临界CO2萃取物中的黄酮类化合物共5种,总相对含量14.3%,萜烯类物质共12种相对总含量为7.24%,有机酸类共29种,相对总含量为19.64%;胶渣超临界CO2萃取物中黄酮类化合物共3种,相对总含量5.02%,萜烯类物质共13种,相对总含量为1.56%,有机酸类共10种,相对总含量为10.86%。采用ICP/MS测定蜂胶超临界CO2萃取物中有害元素铅含量仅为0.17mg/kg,优于国家标准约5倍。采用有机溶剂和硅胶柱层析对蜂胶超临界CO2萃取物的有效成分进行分离,发现主要有效成分黄酮类化合物和萜烯类化合物被富集在柱层析的乙酸乙酯洗脱物中。蜂胶乙醇提取物清除羟自由基和超氧阴离子自由基的能力强于超临界CO2萃取物。蜂胶超临界CO2萃取物的抑菌作用总体弱于蜂胶乙醇提取物,但大大强于蜂胶水提取物。蜂胶超临界CO2萃取物对大肠杆菌的抑菌效果明显,而蜂胶乙醇提取物对大肠杆菌基本上没有抑制作用。新型蜂胶软胶囊的内容物各成分配比为:蜂胶超临界CO2萃取物:二十八烷醇:大豆磷脂:精炼食用油=4:1:1:5,胶壳中明胶与甘油的比例为1:0.35,产品稳定性好。
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