中国松嫩平原三种重要耐盐碱牧草的组织培养和体细胞克隆变异研究——短芒野大麦、星星草和朝鲜碱茅高效组织培养体系的建立及再生植株的遗传及表观遗传变异

来源 :东北师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Whoafraidwh0
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究分别以短芒野大麦幼穗、星星草成熟种子和朝鲜碱茅成熟种子为外植体,建立了稳定、高效的三种重要耐盐碱牧草组织培养体系。并应用AFLP、 S-SAP和MSAP三种分子标记技术对短芒野大麦、星星草和朝鲜碱茅在组织培养过程中产生的遗传变异和基于DNA甲基化变异的表观遗传变异进行了比较分析。研究结果表明,短芒野大麦、星星草和朝鲜碱茅三种牧草的愈伤组织和再生植株在分子水平上均发生了遗传变异和表观遗传变异,且二者在有些情况下密切相关。 选用18对AFLP选择性扩增引物对短芒野大麦供体亲本植株、两瓶愈伤组织和随机选取的44株再生苗进行选择性扩增,共产生793条清晰扩增带,其中73条呈多态性,多态比例为9.3%。不同再生植株产生的多态性条带数目变化很大,从2到55条不等。其中大多数再生植株(68.2%)积累了2-3个变异,而少数再生植株则产生了大量的多态性位点。选用24对S-SAP选择性扩增引物对已进行AFLP检测的两瓶愈伤组织和有代表性的8株再生植株样本进行选择性扩增,共产生768条清晰带,其中151条呈多态性,多态性比例为19.7%,但没有发现BARE-1转座的直接证据。选用22对MSAP选择性扩增引物对以上同样愈伤组织和再生植株进行了选择性扩增,检测到170-196个甲基化的CCGG位点。结果表明,在短芒野大麦再生植株中,CCGG位点内侧C完全甲基化水平和外侧C半甲基化水平及总的甲基化水平均较亲本显著降低,甲基化变异的主要模式是内侧C去甲基化变异。序列分析结果显示,短芒野大麦发生遗传变异和甲基化变异的基因组位点均包括已知功能基因和转座元件。Mentel检测结果表明,MSAP检测结果和S-SAP检测结果之间在统计学上具有显著相关性,其相关系数为0.8118(1000排列,p<0.01),而MSAP检测结果和AFLP检测结果之间没有明显相关性(r=0.1048)。 对来源于同一粒星星草种子的实生苗、3瓶愈伤组织及8株再生植株,分别进行了AFI且S-SAP和MSAP分析。选用19对AFI。P选择性扩增引物对其进行扩增,共产生925条清晰扩增带,其中16条呈多态性,多态性位点比例为1.7%。选用24对S-SAP引物对上述样本进行选择性扩增,共扩增出789个位点,其中36个位点具有多态性,多态性位点比例为4.6%。用16对MSAPi筮择性扩增引物对其进行扩增,分别检测到163-170个甲基化的CCGG位点。与亲本植株相比较,供试的3瓶愈伤组织在所检测到的CCGG位点上两种甲基化即外侧C半甲基化和内侧C完全甲基化水平均表现为轻微程度的降低,变化的主要模式是内侧C去甲基化变异高于超甲基化变异,而再生植株DNA甲基化水平与亲本植株对应的甲基化水平之间差异不显著。Mentel检测结果表明MSAP检测到的DNA甲基化变异及AFIP和S-SAP检测到的遗传变异之间均没有显著的相关性。 同样,对来源于同一粒朝鲜碱茅种子的实生苗、3瓶愈伤组织及8株再生苗,分别进行了AFI且S-SAP和MSAP分析。选用19对AFLP引物对其进行选择性扩增,共产生952条清晰扩增带,其中59条呈多态性,多态比例为6.2%。用24对S-SAPi筮择性扩增引物对上述样本进行了选择性扩增,共扩增出796条DNA片段,其中75条片段具有多态性,多态性位点比例为9.4%。用16对MSAP选择性扩增引物对其进行扩增,分别检测到139-148个甲基化的CCGG位点。与亲本相比较,朝鲜碱茅愈伤组织DNA甲基化水平变化不明显,再生植株CCGG位点内侧C完全甲基化水平和外侧C半甲基化水平及总的甲基化水平均较亲本显著降低,其甲基化变异的主要模式是内侧C去甲基化变异。在朝鲜碱茅体细胞克隆样本中,AFLP S-SAP和MSAP三种分子标记产生的遗传相似性矩阵彼此间相关性显著,尤其是MSAP和S-SAP分析产生的遗传相似性矩阵相关性极为显著,其相关系数为O.9061(1000排列,(p
其他文献
摘要:“新世纪”小学数学实验教材的大纲,在教学目的中指出了小学数学教学的出发点和归宿——“面向现代化,面向世界,面向未来。”以往的教育实施中部分存在向应试方向倾斜的问题,具体体现为:重考试分数,轻能力培养;重课内提高,轻个性发展;片面追求升学率,忽视心理负担。这样单一的目标指向会对学生兴趣和积极性产生负面影响,降低学生学习动力。而新教材的编写无论是从内容的呈现方式,还是页面的设置上都重视小学生已有
中国明对虾是我国重要的海产养殖品种,它肉质鲜美,且营养丰富,备受消费者青睐。但随着集约化高密度养殖以及养殖规模的不断扩大,自上世纪90年代以来,对虾疾病频繁爆发,使海产养殖业
摘要:在传统的教学模式中,学生处于被动的接受状态,其主观能动性无法的得到发挥,从而导致教学质量的下降。高中地理作为教学过程中重要的组成部分,对学生成绩的提升以及综合素质的有效培养意义重大。因此笔者根据自身多年的地理教学经验,对地理教学中如何提升教学质量、优化教学模式提供建设性意见。  关键词:新课改;地理教学;优化策略  在我国课程改革的大背景下,高中地理教学应努力突破传统教学模式的桎梏,教师要改
摘要:本文主要分析了初中物理教学中的问题,提出了践行“以生为本”的理念并运用于实际课堂教学当中。  关键词:初中物理;生活化;趣味实验  在传统的物理教学过程中,教师占有绝对性的主体地位,学生只能被动地学习教师“灌输”的知识,没有自我发挥的空间,而且课程内容也不能有效激发他们的兴趣,这就使得学生的学习主动性丧失,对物理课堂产生一定程度的抵触心理。现今“以生为本”的教学理念越来越受到广大教育工作者的
[目的]本研究通过观察304例PCOS患者的糖脂代谢情况,及47例PCOS患者经二甲双胍治疗3个月后糖脂代谢的变化情况,旨在探讨出改变PCOS患者糖脂代谢紊乱途径,以降低PCOS病人发生Ⅱ型
摘要:众所周知,在信息飞速发展、日新月异的今天,现代教学手段被广泛运用于课堂教学中。这不仅提高了学生的学习兴趣,更是极大地提高了学生的学习效率,有利于学生语文素养的培养。本人在多年的教学实践中,通过传统的说教教学与现代教学手段对比,得出了恰当地运用现代教学方法,对于构建语文教学美优于传统教学方法。本文从运用现代教学手段如何让学生感受事物的形象美,领会文章的语言美、意境美,体会大自然的景色美、领悟优
探究性学习是学生用类似科学研究的方式去获取知识、运用知识与解决问题,以形成新的思维方式和学习能力。新的《数学课程标准》规定“数学内容要有利于学生主动地进行观察、实验、猜测、验证、推理与交流等数学活动”,也是着眼于推进探究性学习等科学的方式方法的。  如何在小学数学课堂教学中比较系统地推进探究性学习呢?  一、创设探索性问题情景,激发学生自主探究  1.情境创设紧扣每个学习环节 在导入阶段,问题情境
期刊