云南蜂胶抑制牙周主要致病菌活性成分的实验研究

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[目的]通过分析云南楚雄姚安蜂胶抑菌有效部位所含的成分,将其提取分离。研究蜂胶抑菌有效部位中的所含成分及其混合物对四种牙周炎主要致病菌的抑制作用,初步寻找蜂胶抑菌主要成分。[方法]1.用高效液相色谱技术对蜂胶抑菌有效部位与咖啡酸、柳穿鱼黄素、乔松素及山姜素对照品进行分析,对比其色谱图。根据HPLC结果用ODS柱层析法将蜂胶有效部位洗脱分离,然后用薄层层析法将Rf值相同的洗脱液合并浓缩,将蜂胶抑菌有效部位分成A、B两个组分。2.厌氧袋法培养牙周炎主要致病菌Pg、Pi、Fn和Aa标准菌株。采用纸片法比较蜂胶抑菌有效部位及咖啡酸、乔松素、组分A、组分B对Pg、Pi、Fn和Aa的抑菌效果。设计实验组和对照组,实验组为5%、2.5%的EEP、咖啡酸、乔松素、蜂胶抗菌有效部位中的A、B;阳性对照组为0.05%甲硝唑,阴性对照组为95%乙醇、95%甲醇。[结果]1.经过高效液相色谱分析,从蜂胶抑菌有效部位和各标准品的色谱图可以看出:蜂胶抑菌有效部位中含有咖啡酸及乔松素,不含柳穿鱼黄素和山姜素。根据以上结果通过ODS柱层析法和薄层层析法相结合将蜂胶抑菌有效部位分离为含有咖啡酸的组分A和不含咖啡酸的组分B。2.对四种牙周致病菌的抑菌研究结果显示,蜂胶抑菌有效部位中的组分A、组分B及其含有的咖啡酸在一定浓度范围内对四种牙周致病菌均有抑制作用,而乔松素对其均无抑制作用。在相同浓度时,蜂胶抑菌有效部位的抑菌效果强于各单体成分及其混合物,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]1.采用高效液相色谱技术分析云南楚雄姚安蜂胶抑菌有效部位的化学成分,结果显示,云南楚雄姚安蜂胶抑菌有效部位中含有咖啡酸、乔松素,不含由姜素和柳穿鱼黄素。通过将ODS柱层析、TLC和HPLC相结合的方法达到将蜂胶抑菌有效部位初步分离的目的。2.在相同浓度时,蜂胶抑菌有效部位的抑菌效果强于其各组分单独的抑菌效果。蜂胶的抗菌作用可能是多种成分协同作用的结果。
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