研究背景和目的:抑郁症是以显著持久的心境低落为核心症状的一种心理疾病。患者会出现严重心理社会功能受限,生活质量降低,自杀行为风险增加。据世卫组织统计它已成为世界上第二大致残原因,给患者、家人及社会造成巨大的负担。有假说认为抑郁症是一种由应激源引起的慢性炎症,而下丘脑-垂体-肾上腺轴在抑郁症的形成中起着关键作用。但抑郁症的具体机制还不明确。慢性不可预见温和应激模型是目前最常用、最可靠、最有效的鼠类抑郁模型。目前公认有效治疗抑郁症的方法是心理疗法和药物疗法,但仍有很多患者治疗效果不佳。羟基红花黄色素A是红花的主要活性产物,具有抗氧化、抗炎、抗凝血以及神经保护等作用。也有研究提示红花及其提取物具有抗抑郁的作用,然而作为红花主要药物活性成分的羟基红花黄色素A在抑郁症中的作用及机制尚不明确。本研究拟使用Wistar雄性大鼠建立慢性不可预见温和应激模型,研究抑郁症与下丘脑-垂体-肾上腺轴、促炎症因子、氧化应激水平、toll样受体4/核转录因子通路蛋白表达水平变化以及羟基红花黄色素A对慢性不可预见温和应激模型大鼠的作用和相关机制。方法:1、本研究使用Wistar雄性大鼠建立慢性不可预见温和应激模型,然后使用经典的旷场实验、强迫游泳、糖水偏爱实验等行为学方法验证模型大鼠的抑郁核心症状。应用ELISA方法测定血清中促肾上腺皮质激素、皮质醇释放激素和糖皮质激素水平变化。应用ELISA方法研究脑组织中的肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β、丙二醛、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平以及检测活性氧化物活性变化。运用q RT-PCR技术研究血浆肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β水平变化。最后应用Western blot方法研究慢性不可预见温和应激大鼠海马组织toll样受体4、磷酸化p65水平变化。2、为研究羟基红花黄色素A对慢性不可预见温和应激模型大鼠抑郁行为的影响及相关机制。先建立慢性不可预见温和应激模型,持续5周,再使用15mg/kg、30mg/kg和60mg/kg不同剂量的羟基红花黄色素A腹腔注射处理慢性不可预见温和应激模型大鼠1周,对照组每天给予等剂量的生理盐水。然后应用旷场实验、强迫游泳、糖水偏爱实验等行为学方法评估动物的抑郁行为改变。使用ELISA方法测定4组大鼠血清中促肾上腺皮质激素、皮质醇释放激素、糖皮质激素以及脑组织中的肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β、丙二醛、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶水平以及检测活性氧化物活性。使用q RT-PCR技术研究血浆肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6、白细胞介素-1β水平。最后应用Western blot方法研究慢性不可预见温和应激大鼠toll样受体4、磷酸化p65水平变化。结果:1、我们首先使用Wistar雄性大鼠建立经典的慢性不可预见温和应激模型,然后应用旷场实验、强迫游泳、糖水偏爱实验等行为学方法评估发现慢性不可预见温和应激模型大鼠比正常大鼠的旷场运动减少,强迫游泳不动时间增加和糖水偏爱指数下降。进一步的研究发现,慢性不可预见温和应激模型大鼠的下丘脑-垂体-肾上腺轴过度激活。慢性不可预见温和应激模型大鼠海马组织的促炎症因子（肿瘤坏死因子α、白细胞介素-6和白细胞介素-1β）水平以及氧化应激水平增加。然后应用Western blot发现慢性不可预见温和应激模型大鼠海马组织toll样受体4/核转录因子κB通路蛋白表达水平上调。2、用15mg/kg、30mg/kg和60mg/kg不同剂量的羟基红花黄色素A腹腔注射治疗1周能够改善慢性不可预见温和应激模型大鼠的抑郁行为,且呈剂量依赖关系。进一步的机制研究发现羟基红花黄色素A能够减轻慢性不可预见温和应激模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的激活,减轻慢性不可预见温和应激模型鼠海马组织的炎症反应和氧化应激水平,且与剂量相关。最后应用Western blot方法发现羟基红花黄色素A能够逆转慢性不可预见温和应激模型大鼠海马组织toll样受体4/核转录因子κB通路蛋白表达水平上调水平,呈剂量依赖关系。结论:羟基红花黄色素A可能通过抑制下丘脑-垂体-肾上腺轴、调控toll样受体4/核转录因子κB通路抑制海马炎症反应和氧化应激水平改善抑郁行为,为抑郁症的治疗提供了新的思路。