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目的:研究正常棕色挪威大鼠(Brown-Norway大鼠)视网膜经810nm微脉冲半导体激光照射后的改变。
材料与方法:BN大鼠65只(共130只眼),使用810nm微脉冲半导体激光,采用不同能量及负载系数照射眼底。分别于激光照射后第1、3、7、14、28天行彩色眼底照相及眼底荧光血管造影(fundus fluorescein angiography,FFA),并处死动物,进行组织病理学观察,通过免疫组织化学方法检测热休克蛋白(heat shockprotein-70,HSP-70)在视网膜的表达情况,用TdT介导dUTP缺口术端标记法检查细胞凋亡。
结果:
(1)阈值及阈上能量低负载系数时,激光照射部位无光学显微镜下的组织病理学改变。阈值及阈上能量高负载系数时损伤严重,可累及视网膜内核层。
(2)正常情况下,视网膜血管及血细胞对DAB显色系统有非特异性的着色,视网膜各层无HSP-70阳性细胞。微脉冲半导体激光照射后大鼠视网膜内核层细胞HSP-70表达有—动态变化,1天时阳性表达细胞即较正常视网膜明显增加,3天时达到高峰,然后逐渐下降,14天时已接近正常水平。HSP-70阳性细胞数量随激光能量提高而增加。
(3)TUNEL染色可见激光照射部位凋亡细胞主要存在于视网膜色素上皮层、外核层、内核层,甚至脉络膜层,其数量随激光能量增高而增多。在激光照射后第3d,凋亡细胞数量最多。
结论:
(1)视网膜的损伤程度与激光能量及负载系数呈正相关,应根据临床实际情况选择激光能量。
(2)微脉冲半导体激光光凝后大鼠视网膜内核层HSP-70的表达升高及细胞凋亡机制可能在组织的损伤修复过程发挥重要的作用。
(3)微脉冲激光光凝后,低能量高负载系数(50mW,50%)或高能量低负载系数(100mW,5%~15%)时,损伤局限于视网膜色素上皮层,避免了神经上皮层的损伤。