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目的:本实验研究苦参碱通过p38/JNK信号通路抑制肝癌细胞增殖并诱导其凋亡的分子机制。方法:1.将不同浓度的苦参碱(0mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml)加入HepG2和BEL-7404肝癌细胞中,分别培养24小时、48小时和72小时后,在倒置相差显微镜下观察各组细胞的形态变化。2.用CCK8法检测不同浓度苦参碱对HepG2和BEL-7404肝癌细胞增殖能力的影响,并计算其抑制率,筛选出苦参碱抑制肝癌细胞增殖的最佳浓度及时间。3.用Annexin V-PI双染法测定不同浓度苦参碱对HepG2和BEL-7404肝癌细胞凋亡的影响,并计算各组细胞凋亡率,筛选出苦参碱诱导肝癌细胞凋亡的最佳浓度。4.将肝癌细胞分为空白对照组、实验组(最佳浓度苦参碱组)、阳性对照组(P38MAPK抑制剂组,JNK抑制剂组)。用Western Blot检测各组细胞中P38MAPK、JNK、pP38MAPK、p-JNK及凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax和Caspase3)的表达。结果:1.随着苦参碱浓度的增加和作用时间的延长,贴壁的HepG2和BEL-7404细胞数量逐渐减少,细胞碎片、漂浮细胞数量不断增加。2.随着苦参碱浓度的递增,HepG2和BEL-7404细胞抑制率明显升高,苦参碱抑制肝癌细胞增殖的最佳浓度为3mg/ml,最佳作用时间为24小时。3.随着苦参碱浓度的增加,HepG2和BEL-7404细胞凋亡率逐渐上升,苦参碱诱导肝癌细胞凋亡的最佳浓度为3mg/ml。4.与空白对照组相比,实验组中P38MAPK和JNK蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05),p-P38MAPK和p-JNK的表达显著增加(P<0.05),促凋亡蛋白Bax和Caspase3的表达量明显增加(P<0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2的表达明显减少(P<0.05)。与阳性对照组相比,实验组中P38MAPK和JNK的表达无明显变化(P>0.05),p-P38MAPK和p-JNK的表达显著增加(P<0.05),Bax和Caspase3的表达也显著增加(P<0.05),Bcl-2的表达则明显减少(P<0.05)。结论:1.苦参碱抑制肝癌细胞增殖,表现为浓度-时间依赖性。2.苦参碱能诱导肝癌细胞凋亡,一定浓度范围内表现为浓度依赖性。3.苦参碱可通过p38/JNK信号通路抑制肝癌细胞增殖,并诱导其凋亡。