【摘 要】
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目的:依托高原人工舱平台,模拟6000m海拔下的低压低氧条件,观测银杏内酯B（Ginkgolide B,GB）对急性低压低氧暴露大鼠认知功能的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:40只雄性SD大鼠适应性喂养3天后,随机分为4组:常氧组（C）、常氧+银杏内酯B组（C+GB）、低压低氧组（HH）、低压低氧+银杏内酯B组（HH+GB）,每组均为10只。常氧+银杏内酯B组和低压低氧+银杏内酯B组以120m
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目的:依托高原人工舱平台,模拟6000m海拔下的低压低氧条件,观测银杏内酯B（Ginkgolide B,GB）对急性低压低氧暴露大鼠认知功能的影响,并探讨其可能的分子机制。方法:40只雄性SD大鼠适应性喂养3天后,随机分为4组:常氧组（C）、常氧+银杏内酯B组（C+GB）、低压低氧组（HH）、低压低氧+银杏内酯B组（HH+GB）,每组均为10只。常氧+银杏内酯B组和低压低氧+银杏内酯B组以120mg/kg银杏内酯B灌胃给药,常氧组和低压低氧组则给予等量的生理盐水,1d/次,连续5d。第五天给药结束后,除常氧组和常氧+银杏内酯B组饲养于常氧环境中,其余组置于模拟6000m海拔的高原人工实验舱内行低压低氧暴露7d。采用经典Morris水迷宫实验评估各组大鼠的认知功能,之后处死大鼠取海马组织制备匀浆或取脑进行组织固定。采用比色法检测海马组织钙离子浓度,实时荧光定量聚合酶链式反应（RT-q PCR）技术检测海马组织Ca M、Ca MKⅡ的m RNA水平,免疫组化技术检测海马组织中Ca M、Ca MKⅡ蛋白的表达水平,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测海马组织Ca M、Ca MKⅡ及其磷酸化蛋白p-Ca MKⅡ的表达水平。结果:1.Morris水迷宫结果显示:与常氧组相比,低压低氧组大鼠水迷宫逃避潜伏期延长（P＜0.01）,目标象限停留时间与穿越平台次数显著减少（P＜0.05）;与低压低氧组相比,低压低氧+银杏内酯B组水迷宫逃避潜伏期显著缩短（P＜0.05）,目标象限停留时间与穿越平台次数显著增多（P＜0.05）。2.钙比色法结果显示:与常氧组相比,低压低氧组大鼠海马组织Ca2+浓度显著上升（P＜0.01）;与低压低氧组相比,低压低氧+银杏内酯B组大鼠海马组织Ca2+浓度显著下降（P＜0.05）。3.RT-q PCR结果显示:与常氧组相比,低压低氧组大鼠海马组织Ca M m RNA水平显著下降（P＜0.01）;与低压低氧组相比,低压低氧+银杏内酯B组大鼠海马组织Ca M m RNA水平显著上升（P＜0.05）。4.免疫组化结果显示:与常氧组相比,低压低氧组大鼠海马组织Ca M蛋白表达显著下调（P＜0.05）;与低压低氧组相比,低压低氧+银杏内酯B组大鼠海马组织Ca M蛋白表达显著上调（P＜0.05）,4组大鼠海马组织中Ca MKⅡ蛋白表达水平均无显著变化（P＞0.05）。5.Western blot结果显示:与常氧组相比,低压低氧组大鼠海马组织Ca M、p-Ca MKⅡ蛋白表达显著下调（P＜0.01）;与低压低氧组相比,低压低氧+银杏内酯B组大鼠海马组织Ca M、p-Ca MKⅡ蛋白表达显著上调（P＜0.01）,4组大鼠海马组织中Ca MKⅡ蛋白表达水平均无显著变化（P＞0.05）。结论:急性低压低氧暴露可导致大鼠出现认知功能损伤,银杏内酯B干预可有效调控海马神经元钙稳态平衡,通过调节海马Ca2+/Ca M-Ca MKⅡ信号通路,缓解急性缺氧下神经元的损伤,进而改善急性低压低氧暴露所致的大鼠认知功能障碍。
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