论文部分内容阅读
研究背景早发冠心病（premature coronary heart disease,PCHD）是指男性在55岁之前或者女性在65岁之前发生的冠心病（coronary heart disease,CHD），是CHD的一种特殊形式。PCHD是由多种致病因素综合作用所引起的一种炎症反应性疾病，遗传因素在PCHD的发病中发挥了举足轻重的作用。因此，研究PCHD的遗传相关危险因素对于开展有针对性的人群预防，延缓或防止PCHD的发生、发展具有重要的意义。研究表明，血浆中同型半胱氨酸（homocysteine,Hcy）水平可能与CHD的发病存在有相关性，较高水平Hcy或许会增加CHD的患病风险。Hcy水平不仅受到环境因素的影响，更重要的是它具有高度的遗传异质性。Hcy代谢的关键酶之一是N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydofolate reductase,MTHFR），而编码MTHFR的是MTHFR基因。遗传学研究证实，Hcy的遗传异质性可能与MTHFR基因C677T多态性存在有相关性。目前已有部分关于MTHFR基因C677T多态性与PCHD发病的相关性研究报道，但在这些研究报道中MTHFR基因C677T多态性是否与PCHD患病风险存在有相关性却不尽一致，究其原因可能与研究对象的种族和民族不同、地域和纬度差异、多基因遗传、样本量大小和统计学方法不同等因素有关。目前尚未见有关MTHFR基因C677T多态性与苏皖地区汉族人群PCHD发病的相关性研究报道。基于以上的研究背景，在本研究中采用基于群体的病例-对照研究方法，对MTHFR基因C677T多态性及血浆Hcy水平与苏皖地区汉族人群PCHD患病风险的相关性做初步探索。目的1.研究苏皖地区汉族人群早发冠心病患者与正常对照人群间N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性位点的分布特点，比较早发冠心病患者与正常对照人群之间这个位点基因型分布和等位基因频率分布的差异性，探索N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性与早发冠心病的遗传易感性。2.分析苏皖地区汉族早发冠心病人群中N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性与血浆同型半胱氨酸水平的相关性。方法基于群体的病例-对照关联研究：1.收集100例早发冠心病患者和103例正常对照者的血样，提取基因组DNA，并对研究对象的一般临床资料进行统计学描述。2.采用循环酶法对两组入选者进行血浆Hcy水平的测定。3.应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法，分别检测两组研究对象的MTHFR基因C677T单核苷酸链（single nucleotide polymorphism,SNP）位点基因多态性。4.分别计算C677T SNP位点基因型及等位基因在病例组和对照组中的频率分布，并进行Harder-Weinberg平衡吻合度检验，用以确定是否所选取的SNP位点在病例组和对照组中均处于遗传平衡状态，是否具有群体代表性。5.分别比较不同组间血浆Hcy的平均水平。结果1.病例组血浆Hcy的平均水平显著高于对照组血浆Hcy的平均水平，差异有统计学意义（P＜0.05）。2.遗传平衡性检验：分别对两组MTHFR基因C677T多态性位点的基因型分布进行Harder-Weinberg平衡检验。结果为两组P值均大于0.05，所入选人群符合Harder-Weinberg平衡，具有群体代表性。3. MTHFR基因C677T多态性的TT基因型在病例组中分布频率明显高于对照组，总突变T等位基因频率分布高于对照组（P＜0.05）4.不同MTHFR C677T基因型者其血浆Hcy水平不等（P＜0.05）5.与MTHFR C677T的CC型相比，TT型及CT+TT型者患PCHD的风险增加（P＜0.05）6.病例组MTHFR基因C677T的CC基因型和CT基因型者血浆Hcy平均水平均高于同基因型对照组血浆Hcy平均水平（均P＜0.05）；病例组TT基因型者血浆Hcy平均水平与对照组TT基因型者血浆Hcy平均水平相比较无明显差异（P＞0.05）结论1. N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性可能与苏皖地区汉族人群早发冠心病的发病存在有相关性，TT基因型可能会增加苏皖地区汉族人群早发冠心病的遗传易感性，携带T等位基因的个体发生早发冠心病的风险可能会增加。2. N5，N10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C→T突变可能会升高血浆同型半胱氨酸的水平。3.血浆同型半胱氨酸水平升高可能会增加早发冠心病的患病风险。