美洲大蠊化学成分及其制剂康复新液的质量控制研究

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美洲大蠊(Periplaneta americaL.)是有翅亚纲蜚蠊目蜚蠊科大蠊属昆虫,在全球分布极其广泛,见于除两极之外的世界各地;具有“活血散瘀、消疳、利水消肿、解毒等功能;主治症瘕积聚、小儿疳积、脚气水肿、疔疮中毒及蛇咬伤等”,目前国内市场在售的美洲大蠊中药制剂有治疗各种外伤创面的“康复新液”,治疗心血管病的“心脉隆注射液”,治疗乙型肝炎新药“肝龙胶囊以及辅助治疗原发性肝癌的“消癥益肝片”。为给美洲大蠊化学基础研究提供理论依据,探讨制剂质量标准的指标优化,保障临床用药的安全,本课题以美洲大蠊为研究对象,对其化学成分及其制剂康复新液的质量控制进行了研究。主要研究成果如下:1.美洲大蠊化学成分研究利用正向硅胶柱层析,SephadexLH20凝胶柱层析,RP-HPLC半制备液相色谱,制备薄层色谱和ODS中压柱色谱对美洲大蠊提取物进行成分分离和纯化,根据理化性质和波谱数据,质谱数据等信息鉴定出26个化合物,分别是(1)尿嘧啶,(2)次黄嘌呤,(3)肌苷,(4)硫代吗啉,(5)环甘氨酰酪氨酸,(6)L-亮氨酸,(7)苯丙氨酸,(8)酪氨酸,(9)异亮氨酸,(10)缬氨酸,(11)丙氨酸,(12)甘氨酸,(13)苏氨酸,(14)原儿茶酸,(15)12-羟基十八碳酸,(16)13-二十碳烯酸,(17)10-十九碳烯酸,(18)十四烷,(19)丙三醇,(20)11-十八碳烯酸乙酯,(21)2,3-二羟基丙三醇-1-十六碳酸酯,(22)1,3-十七烷酸甘油二酯,(23)6-羟基十八碳酸乙酯,(24)邻苯二甲酸双十二烷基酯,(25)7-十九碳烯酸乙酯,(26)胆甾醇。其中有13个化合物是首次从该昆虫中分得的。2.美洲大蠊单方制剂康复新液的HPLC指纹图谱研究采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2012.130723版)建立了制剂康复新液的HPLC指纹图谱,同时对市面上3个厂家总共9批康复新液的指纹图谱进行了相似度评价,确定了这9批康复新液的22个共有峰,相似度范围为0.932~0.993。同时利用HPLC系统在280nm下对美洲大蠊制剂康复新液共有峰中的主要成分进行分析和比对,共鉴定出尿嘧啶,原儿茶酸,次黄嘌呤,黄嘌呤,肌苷5种主要成分,以上均为美洲大蠊制剂康复新液质量控制的优化奠定了基础。3.美洲大蠊制剂康复新液含量测定研究利用HPLC系统建立了美洲大蠊制剂康复新液中的5种主要成分含量测定方法,并在280nm下,绘制了尿嘧啶,原儿茶酸,黄嘌呤,次黄嘌呤,肌苷等成分的标准曲线,运用已经建立的含量测定方法,对9批不同厂家的康复新制剂进行了含量测定。结果表明,9批不同厂家的康复新制剂的这5种成分含量存在差异,需要进一步规范提取工艺,同时需要改进质量标准进行多成分的质量控制。4.对美洲大蠊的化学成分以及生物活性的研究近况进行文献综述。目前报道称美洲大蠊体内含有多糖,肽类和氨基酸,核苷类,油脂类,多元醇,生物碱,异香豆素,黄酮,甾体及萜类化合物;主要的药理活性为抗肿瘤,抗肝纤维化,抗炎消肿,组织修复以及心肌保护等作用。
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