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Orexin是一种通过其受体(OX1R和OX2R)发挥功能的神经肽,被分为Orexin A和Orexin B两种。研究发现Orexin的分布非常广泛,参与调节多种生理功能,如对内分泌、生殖活动的调控和调节摄食与能量平衡、以及对药物成瘾的影响等。为了探索不同浓度Orexin A在不同时间对绵羊卵巢黄素化颗粒细胞中StAR.CYP11和3β-HSD (黄体功能相关基因)的影响,本实验首先对绵羊卵巢颗粒细胞体外培养使其转变成黄素化颗粒细胞,即对颗粒细胞添加LH(2.5IU/ml)、 FSH(2.5IU/ml)、E2(lμg/mL)后培养24h。而后再对该黄素化颗粒细胞添加不同剂量(0.05,0.2,0.5和1μg/mL) Orexin A,分别于刺激后0、2、6、12h和24h提取细胞总RNA,运用qPCR方法检测了Bax/Bcl-2、OX1R以及黄体化相关基因CYP11、3β-HSD、StAR mRNA表达量的变化。结果显示,添加Orexin A后,与对照组相比,Bax/Bcl-2的值显著升高,说明Orexin A可以促进黄素化颗粒细胞凋亡；与对照组相比,2h时1μg/ml Orexin A和12h时0.2μg/ml浓度组均上调OX1R mRNA的表达；另外与对照组相比,1μ g/ml浓度组在2h时StAR、CYP11和3β-HSD mRNA表达量都显著下降,且0.2μg/ml浓度组在12h时StAR和3β-HSD mRNA表达量显著下降,CYP11无显著性变化。这说明1μ g/ml和0.2μg/ml Orexin A分别在2h和12h时能抑制StAR. CYP11和3β-HSDmRNA的表达,进而可以促进黄体退化。本实验通过不同时间对在体外诱导绵羊卵巢颗粒细胞转变成的黄素化颗粒细胞添加不同剂量Orexin A,确定了Orexin A对黄素化颗粒细胞中黄体功能相关基因StAR、CYP11和3β-HSD表达量的影响,为进一步研究Orexin A对生殖的作用奠定了基础。