为了研究胃癌组织中P16蛋白和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其相关性，应用S-P免疫组织化学方法及形态定量分析方法，检测胃癌标本78例、胃良性病变15例组织中P16蛋白及VEGF的表达，探讨其在胃癌发生、发展中的作用以及两者的相关性。材料与方法：收集吉林大学第一、二、三医院普外科2001—2003年手术切除的胃癌标本78例。患者术前均未接受化疗或放疗，经病理诊断为胃癌。其中腺癌32例，粘液腺癌30例，低分化癌9例，未分化癌7例；另取胃镜活检15例胃良性病变（浅表性胃炎7例、萎缩性胃炎8例）标本做对照组。PTNM分期（1997年国际抗癌联盟IUCC公布胃癌分期标准）：Ⅰ期+Ⅱ期48例，Ⅲ期+Ⅳ期30例。男性46例，女性32例；年龄41岁-75岁，平均年龄56岁。肿瘤直径1-6cm，淋巴结有转移者34例，无转移者44例。全部标本按标准取材及处理后，备常规HE染色及免疫组织化学染色。免疫组织化学染色试剂：链霉菌抗生物素－过氧化酶免疫组化染色超敏试剂盒（Ultra Sensitive S－P kit），CD34单克隆抗体，VEGF单克隆抗体及P16单克隆抗体均购自福州迈新生物技术开发公司，所有抗体均为既用型；抗原修复缓冲液（0.01M枸橼酸盐缓冲液 PH值6.0）；工作液。免疫组织化学染色采用S－P法。免疫组织化学染色过程中，以PBS代替一抗作阴性对照，用已知VEGF阳性和P16阳性的胃癌组织切片作阳性对照。结果判定：分别以肿瘤细胞及血管内皮细胞胞浆、胞膜或胞核出现棕黄色颗粒，且其着色强度高于背景者判定为阳性。形态定量方法：1，VEGF计量方法：VEGF表达的判定以染色<WP=33>强度和阳性细胞百分率的得分之和进行评估。（a）染色强度：阴性为0，弱阳性为1，阳性为2，强阳性为3；（b）阳性细胞百分率：无阳性细胞为0，<25%为1，26-50%为2，>0%为3，a+b之和最高为6，0-2视为阴性，3-6视为阳性。2，P16计量方法：每张切片选取5个高倍镜视野，记数阳性细胞数后取其平均值。平均每视野阳性细胞数百分率大于10%为阳性，小于或等于10%为阴性。统计学处理：采用四格表χ2 检验。 结果：1．78例胃癌中P16阳性表达率为48.72%（38/78），主要表达于肿瘤细胞的胞核，呈棕黄色颗粒，部分胞浆也有表达。P16表达与年龄、肿瘤大小、组织学分型、分化程度均无关（P>0.05），而与肿瘤部位、淋巴结转移和临床分期密切相关（P<0.01）。2．在78例胃癌中，VEGF阳性表达率为75.64%（59/78），其阳性部位主要为肿瘤细胞胞浆或胞膜，癌巢边缘细胞染色强度较中心部强，间质炎细胞及邻近微血管内皮细胞也有不同程度的表达。在导管癌呈弥散分布，在腺癌则呈腺泡状分布，在癌细胞组成的岛状或腺状结构的基板上也存在强VEGF表达。VEGF表达与胃癌淋巴结转移、临床分期密切相关（P<0.05），而与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型无关（P>.05）。 3．59例VEGF阳性标本中有29例P16阳性，19例VEGF阴性者中16例P16阳性， P16下调与VEGF上调具有相关性（P<0.01），即随着VEGF表达的上调，P16表达下调。结论：1．胃癌中存在P16蛋白下调,VEGF上调。2．P16蛋白阳性物质主要分布于细胞核，少数见细胞质着色。其表达与胃癌淋巴结转移、肿瘤细胞及临床分期有关，而与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型、<WP=34>分化程度无关。3．胃癌VEGF主要表达于肿瘤细胞胞浆或胞膜，间质炎细胞及微血管内皮细胞也见少量表达；VEGF表达与胃癌淋巴结转移、临床分期有关，而与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型、分化程度无关。4．胃癌中P16下调与VEGF上调具有相关性。P16蛋白和VEGF在胃癌中表达的相关性78例胃癌中，29例P16和VEGF均呈阳性表达，30例VEGF呈阳性表达而P16呈阴性表达，16例P16阳性表达而VEGF阴性表达，3例两者均呈阴性表达。应用配对资料卡方检验显示，P16蛋白和VEGF具有明显相关性(P<0.01)。