【摘 要】
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目的:研究糖尿病和正常大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗心肌梗死(MI)的疗效差别。方法:健康雄性SD大鼠2月龄80只,取其中20只给予高糖、高脂饮食(正常大鼠饲料按配比加入猪油及
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目的:研究糖尿病和正常大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗心肌梗死(MI)的疗效差别。方法:健康雄性SD大鼠2月龄80只,取其中20只给予高糖、高脂饮食(正常大鼠饲料按配比加入猪油及白砂糖),并监测大鼠尾血糖值>16.7mmol/L,糖尿病大鼠模型建立成功。无菌条件下将糖尿病及正常大鼠骨髓贴壁培养获取骨髓间充质干细胞,流式细胞术检测第2代贴壁细胞。绘制细胞生长曲线,将检测合格的细胞直视下移植注射入心肌梗死模型的病灶区。取60只正常大鼠建立心肌梗死模型后,随机分为3组,正常大鼠骨髓间充质干细胞移植组、糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞移植组、空白对照组(假手术组)。按分组情况进行移植。移植后1月检测心脏超声(Ejection fraction,EF值)、HE染色法检测各组梗死区域心肌组织形态的变化;通过免疫组化方法检测BCL-2(B-cell lymphoma-2)的表达。结果:贴壁培养的骨髓间充质干细胞呈梭形,漩涡状排列,糖尿病大鼠的所形成的干细胞集落较正常大鼠的明显要小,且细胞伸展无力,较为扁平,细胞增殖能力较低。流式细胞仪显示细胞表面的免疫分子的表达:CD90(96.12%);CD44(95.14%);CD29(94.51%);CD31(3.25%);CD34(1.17%);CD45(3.17%);绘制细胞生长曲线结果显示正常大鼠骨髓间充质干细胞较糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞生长快。移植术后1月正常大鼠骨髓间充质干细胞移植组EF值比术前明显提高(P<0.05),且比糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞移植组及假手术组明显提高(P<0.05)。移植术后1月正常大鼠骨髓间充质干细胞移植组梗死区域心肌组织形态较糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞及假手术组明显改善。糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞移植组与假手术组心功能检测指标(EF值)比较无明显统计学差异(P>0.05)。结论:通过对细胞形态的观察及流式细胞术鉴定,大鼠股骨骨髓贴壁培养可获取纯度较高的骨髓间充质干细胞。通过对正常及糖尿病大鼠骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的比较证实糖尿病使骨髓干细胞移植治疗心肌梗死的疗效降低。
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