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饲料中添加抗生素和重金属盐可预防畜禽生病、促进畜禽生长、提高饲料转化率,因此高剂量的重金属盐如硫酸铜和氧化锌被添加到猪饲料中。长期使用重金属盐作为饲料导致人们对重金属在畜禽产品中的残留和随粪便排入环境造成污染的关注。欧盟国家首先禁止除治疗目的以外的抗生素添加到饲料中,但抗生素抗性细菌仍然在畜禽养殖环境中被分离到。对这些抗性细菌的研究了发现抗重金属的基因和抗生素抗性基因同时存在抗性质粒上。从这些研究结果可以推断在停止使用抗生素作为饲料添加剂后,重金属继续作为饲料添加剂使用选择并维持了畜禽养殖环境的抗生素抗性基因。欧盟国家目前已经把饲料中添加硫酸铜和氧化锌的量控制在营养需要的水平。我国猪场饲料中仍然添加高剂量的硫酸铜和氧化锌作为生长促进剂使用,但猪场环境中抗铜细菌的发生情况及这些抗性细菌是否带有抗铜基因、抗生素抗性基因和毒力基因未见研究报道。为了解猪场环境中抗性细菌的发生率,本论文研究从昆明地区9个饲料中添加不同量金属盐的规模化猪场中采集不同年龄段的猪粪样品及猪场周边的土壤样品分离抗铜细菌。从猪粪样品中共筛选出340株抗铜肠细菌,329株被鉴定为大肠杆菌(E. coli)、9株被鉴定为变形杆菌属(Proteus)细菌、2株被鉴定为志贺氏菌属(Shigella)细菌。完全使用预混饲料的养猪场抗铜大肠杆菌的发生率达到45.8%以上,使用50 %预混饲料的养猪场抗铜大肠杆菌的发生率达到28.3%以上,而未使用预混饲料的养猪场抗铜大肠杆菌发生率在3.3%以下。仔猪生长阶段猪粪中抗铜大肠杆菌出现的百分率在82.20%-47.5%之间,生长育肥猪阶段猪粪中抗铜大肠杆菌出现的百分率在60.0%-26.3%之间,出栏猪阶段猪粪中抗铜大肠杆菌出现的百分率在33.3%-13.8%之间。猪场周边的土壤样品中存在15%的抗铜肠细菌。结果表明:在饲料中添加金属盐的猪场猪粪中普遍存在具有铜抗性的肠细菌,不同养猪场猪粪中抗铜大肠杆菌的发生率与饲料中添加的硫酸铜量成正相关性,不同生长阶段猪粪中抗铜大肠杆菌的发生率与饲料中添加的硫酸铜量成正相关性;猪场中的抗性细菌有向周边环境扩散的趋势。为检测抗铜菌株中所携带的抗性基因和毒力基因,本研究用PCR方法在抗铜菌株(包括大肠杆菌、变形杆菌和志贺氏菌)中检测到了抗铜基因pcoA、pcoC、pcoD,进一步在携带抗铜基因pco的抗铜菌株中检测到了抗生素抗性基因strA、strB、tet(B)和毒力产生基因fimH、traT。这个研究结果表明:饲料中添加金属盐作为生长促进剂会导致猪肠道中铜抗性肠细菌发生,同时也会协同选择并维持了细菌的抗生素抗性和产毒素的能力。