大黄不同炮制品对大承气汤活性成分及药效影响研究

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目的:中药大黄药用历史悠久,是常用中药之一,常以不同的炮制品组成方剂使用,发挥其独特的治疗作用。中药炮制的核心是中药在炮制后药性发生变化,随之其药效物质基础发生改变。研究大黄六种炮制品即生大黄、清蒸大黄、熟大黄、酒大黄、醋大黄和大黄炭分别与厚朴、枳实和芒硝配伍后,其泻下、内毒素、NO和TNF-α的药理药效试验;HPLC法同时测定大黄不同炮制品对大承气汤活性成分含量变化;建立大黄不同炮制品的大承气汤“成分-功效”的分析方法;从大黄不同炮制品对大承气汤方剂的活性成分及药效影响和探讨其活性成分与其药理药效的相关性,阐述中药炮制品对其方剂的活性成分及药效影响变化的机制,也为中药不同炮制品的方剂的研究提供新的思路与方法。方法:参考《全国中药饮片炮制规范》、《中药炮制》和2015年版《中国药典》以及相关文献,炮制出不同的大黄炮制品;对正常小鼠泻下作用、炭末推进作用、小鼠结肠壁细胞Na+-K+-ATPase活性、小鼠血清内毒素、NO和TNF-α的试验研究,比较大黄不同炮制品的大承气汤对正常小鼠的泻下作用、炭末推进作用、小鼠结肠壁细胞Na+-K+-ATPase活性以及小鼠血清内毒素、NO和TNF-α含量的影响;使用HPLC法,以色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18 5μm(4.6mm x 250mm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1ml·min-1,检测波长280nm和254 nm,柱温30℃的条件下,测定大黄六种不同炮制品的大承气汤中10个活性成分的含量,并分析其含量变化规律。结果:1.大黄经过规范的炮制方法炮制后得到的大黄六种不同炮制品均符合药用标准;2.大黄六种不同炮制品对大承气汤的泻下作用均有不同程度的影响,但其变化差异在一定程度上与大黄的不同炮制品存在着共性关系。生DCQT组、清蒸DCQT组、熟DCQT组、酒DCQT组、醋DCQT组以及炭DCQT组与空白对照组及阳性对照组比较,其对正常小鼠正常泻下作用、炭末推进作用、抑制Na+-K+-ATPase活性的作用均有差异性,且六个给药组间比较,对生DCQT组泻下作用的影响的差异最显著,给药剂量6 g·kg-1、10g·kg-1组均有显著差异;3.大承气汤各试验组除了炭DCQT组都可软化大便和促进实热壅滞的粪性腹膜炎小鼠迅速排便,在粪性腹膜炎小鼠饮水量上,除了炭DCQT组外各大承气汤组均明显高于阳性组和模型组。4.大黄不同炮制品的大承气汤组都能增加ABP小鼠血清NO含量,但与其它大承气汤组相比,炭DCQT组增加ABP小鼠血清NO含量不明显。5.大黄不同炮制品的大承气汤组都能降低ABP小鼠TNF-ɑ含量,但与其它大承气汤组相比,炭DCQT组降低ABP小鼠血清TNF-ɑ含量不明显。6.大黄不同炮制品的大承气汤中的10个活性成分的10条标准曲线在检测范围内均呈良好线性关系;方法学考察达到试验要求。大黄不同炮制品的大承气汤中的10个活性成分含量均有不同程度的变化,与生DCQT组比较,其它不同炮制品的大承气汤中蒽醌类成分的含量均降低,其中降幅最大的是炭DCQT组,而其它活性成分变化不显著。结论:本试验对大黄不同炮制品的大承气汤进行泻下作用、内毒素、NO和TNF-α含量变化差异和其活性成分进行研究,大黄不同炮制品对大承气的泻下作用、内毒素、NO和TNF-ɑ的含量及10个活性成分含量均有不同程度的改变,这些变化与大黄不同炮制品配伍的大承气汤作用相对应,且大黄蒽醌类成分含量的变化在一定程度上对大承气汤的功效存在着一定的影响和共性关系。
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