脂麻花醇提物体外抗肿瘤生物活性及其机理的初步研究

来源 :暨南大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:sarahfung
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:筛选和分离脂麻花醇提物中的抗肿瘤活性组分,并探讨其有效组分抗肿瘤作用的机理。
  方法:系统溶剂法从脂麻花乙醇提取物中萃取分离出不同的组分,用MTT法观察脂麻花不同提取物体外对肿瘤细胞株增殖的影响;选取活性较好的组分SIA,检测其对敏感肿瘤细胞株增殖抑制活性的时效关系。进行Hoechst33258染色,观察SIA诱导Hela细胞凋亡作用;采用PI染色和流式细胞术,观察SIA对细胞凋亡率及细胞周期的改变;应用caspase活性检测试剂盒,观察SIA对caspase-3、caspase-8、caspase-9活性的影响;流式细胞仪检测Fas蛋白表达的变化。
  结果:(1)体外抗肿瘤作用:结果显示,脂麻花醇提物的石油醚和乙醚提取部位对肿瘤细胞株(人肝癌细胞株smmc-7721、人宫颈癌细胞株Hela、人食管鳞癌细胞株KYSE-410和人鼻咽癌细胞株CNE-2细胞)的增殖具有明显的抑制活性。对石油醚部位进一步分离得到的6个组分,其中SIA组分抗肿瘤效果最好,对多种肿瘤细胞株表现出不同程度的抑制作用,尤其对Hela细胞的抑制作用较强,且呈剂量、时间双重依赖性的特点(P<0.05)。(2)对细胞凋亡的影响:形态学检查可见,SIA200μg/mL作用于Hela细胞12h后,肿瘤细胞明显变小变圆,细胞存活率降低,细胞核固缩并出现致密浓染蓝白色颗粒状荧光的凋亡小体。细胞周期检查结果显示,SIA50μg/mL及100μg/mL作用于Hela细胞48h后,G0/G1期细胞减少(P<0.05),S期细胞增多(P<0.01),G2/M期细胞减少,细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。SIA100μg/mL作用于肿瘤细胞后,Caspase家族中caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的活性呈时间依赖性增高(P<O.01)。SIA(25、50、100μg/mL)作用于Hela细胞48h后对Fas蛋白的表达呈剂量依赖性升高,在高剂量(100μg/mL)时较明显(P<0.05)。
  结论:(1)脂麻花醇提物石油醚和乙醚提取部位对体外培养的多种肿瘤细胞株具有明显的抗增殖作用;(2)脂麻花石油醚提取部位分离的组分SIA对体外培养的多种肿瘤细胞具有不同程度的增殖抑制作用,其中对人宫颈癌细胞Hela的抑制作用最强,其抑制作用呈一定的剂量依赖性和时间依赖性。(3)脂麻花提取物组分SIA可诱导细胞凋亡,影响细胞周期分布,可能和其抗肿瘤作用机理有关。肿瘤细胞内Fas蛋白的表达上调及凋亡通路中caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的激活可能参与了SIA诱导肿瘤细胞凋亡的作用。
其他文献
车桑子(亦称坡柳、明油子,Dodonaea viscosa L.)是无患子科(Sapindaceae)坡柳属(Dodonaea)植物,为小乔木或灌木,在南北半球的热带,亚热带地区均有分布。车桑子是云南干热河谷地区重要的造林树种,在金沙江流域、红河流域等地区,都有很大的造林面积。生物学及药理学实验证明,车桑子的粗提物具有灭螺活性、除草、对米象的触杀作用、对小菜蛾、小菜粉蝶幼虫的拒食活性等。但是目前对
学位
理想的眼部给药系统,应该以滴眼液的形式给药,不引起视力模糊或产生眼部刺激;具有适宜的粘度能抵制泪液的稀释,不会在给药后迅速流失;有较长的眼部滞留时间,能提高药物的生物利用度。本文选择离子敏感型高分子多糖结冷胶(Gelrite)作为原位凝胶基质,海藻酸钠(Alginate)作为增粘剂,制备苦参碱眼用凝胶。采用单因素考察法筛选处方,以粘度和胶凝能力为评价指标初步确定处方。用旋转式粘度计测定粘度,考察不
学位
中药中有害物质农药残留、重金属、黄曲霉毒素、微生物限度超标等问题,严重影响中药品质和用药安全,越来越受到各国政府和公众的关注,已成为制约中药发展的主要障碍之一。川产道地药材白芷、黄连系重要的常用中药品种,具有悠久的药用历史。现行《中国药典》只规定了黄芪、甘草两种中药中有机氯类农药残留限量,这与我国中药发展现状明显不符。本论文对不同产地、来源的白芷、黄连药材及其生长环境(主要是土壤)中有机氯类、有机
学位
目的:初步研究高脂血症所致的家兔早期肺部病变情况及损伤的可能机制,以及山楂提取物和绞股蓝总苷合用(以下称SJ)的干预作用。方法:雄性日本大耳白兔50只,体重1.9-2.3kg,随机选取10只作为正常组家兔,喂饲普通兔颗粒饲料,其余40只均给予高脂饲料(1%胆固醇、5%蛋黄粉、5%猪油、89%普通饲料)喂饲,以复制高脂血症家兔模型。造模第四周时,取血分离血清,测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG
学位
目的:观察补肾填精方对γ射线所致辐射损伤小鼠模型的作用,并通过观察其对DNA损伤修复ATM/ATR通路的影响,探讨该方抗辐射的作用机制。方法:将雌雄各半的balb/c小鼠,分成正常组,病理对照组,补肾组,补血组及补阴组。采用γ射线损伤小鼠模型,在造模后取脾脏运用real-time RT-PCR方法检测该通路关键基因ATM和ATR基因的表达,并应用免疫组化方法对该通路上重要蛋白表达结合图像分析技术进
学位
本课题以中医药理论为指导,运用现代制药技术,对该制剂进行了临床前药学部分的研究。制剂处方系由蛇床子、艾叶、栀子等药味组成,具有清热燥湿,杀虫降低止痒之功效。主治妇女湿热带下,适用于霉菌性、滴虫性及非特异性阴道炎。原剂型为洗剂,将该剂型改为阴道用生物黏附凝胶剂,旨在解决阴道洗剂存在的不易黏附于阴道壁、作用时间较短及储存不易等共性问题。根据处方功能主治及药物所含的理化成分,筛选出最佳工艺路线为:蛇床子
学位
目的:研究脑血通鼻腔喷雾乳剂对局灶性脑缺血病变的防治作用,并初步探讨其可能的作用机制,为其在临床应用提供药理学依据。方法:运用大鼠局灶性永久脑缺血模型、大鼠局灶性脑缺血再灌注模型及高脂大鼠脑缺血再灌注模型,观察脑血通鼻腔喷雾乳剂对实验性脑缺血模型的保护作用。采用柱前衍生化高效液相色谱紫外检测法测定脑组织内的Glu、Asp及GABA含量,采用荧光分光光度法测定脑内DA及5-HT的含量,探求脑血通发挥
学位
目的:观察脂质异常家兔内皮损伤及山楂叶提取物的干预作用,探索山楂叶提取物干预血管内皮损伤的可能机制。方法:选取雄性日本大耳白兔50只,体重1.9-2.3kg,随机取10只为正常组家兔,喂饲普通兔颗粒饲料150g/d/只,其余40只*注释均给予高脂饲料(1%胆固醇、5%蛋黄粉、5%猪油、89%普通饲料)喂饲150g/d/只。造模4周时,禁食不禁水16h以上,从兔耳缘静脉取血,2500rpm离心15m
学位
黄连为毛莨科植物黄连(Coptis chinensis Franch.)、三角叶黄连(C.deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao)、云南黄连(C.teeta Wall.)的干燥根茎。药材依次习称“味连”、“雅连”、“云连”,始载于《神农本草经》。味连也称鸡爪连、川连,为目前应用最广的黄连品种。《唐本草》载:“蜀道者粗大,味极苦,疗渴为最,江东者节如连珠,疗痢大著。”,李时珍谓:“
学位
目的:观察葛根素对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells, EPCs)增殖和迁移的影响,并与生理浓度的雌激素(E2)作用效果作比较。方法:(1)抽取健康足月孕产妇胎盘脐带血,采用明胶沉淀法联合密度梯度离心法分离获得单个核细胞。(2)诱导分化:接种活细胞于纤维连接蛋白包被的培养瓶中(4μg/cm2),孵育24小时后取未贴壁细胞继续培养至第四天,用磷酸盐缓冲液洗掉未贴壁细
学位