论文部分内容阅读
目的：检测T24/ADM细胞的多药耐药性。确定环孢霉素A对T24/ADM细胞的非毒性剂量逆转范围。探讨单独逆转组（α-干扰素或环孢霉素A）和联合逆转组（α-干扰素和环孢霉素A）对T24/ADM细胞的逆转作用。方法：复苏培养T24、T24/ADM细胞，MTT法检测其耐药性，流式细胞术检测T24、T24/ADM细胞P-gp的表达率。MTT法检测不同浓度环孢霉素A对T24/ADM细胞的毒性作用。分别以不同浓度梯度环孢霉素A（0.1、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0μg/ml）加入到T24/ADM测定其细胞抑制作用并确定其非毒性浓度。MTT法测定单独逆转组（环孢霉素A或干扰素-α）和联合逆转组（环孢霉素A和干扰素-α）对T24/ADM细胞的抑制率，流式细胞术检测T24/ADM细胞P-gp的表达率。结果：1.检测T24/ADM耐药性。实验组阿霉素对T24细胞的IC5=1.84μg/ml，对T24/ADM细胞IC50=7.25μg/ml，RI=3.94，析因方差分析各浓度间差异具有统计学意义（P＜0.05）。2.环孢霉素A浓度为4.0μg/ml时，对T24/ADM细胞生长抑制率为（4.27±0.71）%,环孢霉素A浓度≤4.0μg/ml对T24/ADM细胞无明显细胞毒作用（细胞生长率≥95%时的浓度作为非细胞毒性剂量），因此把环孢霉素A浓度≤4.0μg/ml作为逆转非细胞毒性剂量范围。3.测定单独逆转组、联合逆转组对T24/ADM细胞的逆转作用。当CsA浓度为1.0μg/ml时,其对T24/ADM细胞的抑制率(18.8±0.027)%（P＜0.01）。当TNF-α浓度为4.0×106u/l,其对T24/ADM细胞的抑制率(37.8±0.025)%（P＜0.01）。当浓度为2.0×106U/L的INF-α联合浓度为0.1μg/ml的CsA时其对T24/ADM细胞的抑制率(38.4±0.025)%（P＜0.01），就与浓度为2.0μg/ml的CsA单独逆转效果相当。CsA联合TNF-α时比单独使用一种有更好的效果，且呈明显剂量效应关系,二者联合应用，呈协同效应。4.α-干扰素和环孢霉素A对T24/ADM细胞P-gp表达率的影响。CsA实验组与对照组相比，对T24/ADM细胞P-gp表达率差异无统计学意义(P>0.05)，CsA不影响T24/ADM细胞P-gp的表达。TNF-α实验组与对照组相比，对T24/ADM细胞P-gp表达率差异无统计学意义(P>0.05)，TNF-α也不影响T24/ADM细胞P-gp的表达。当CsA+TNF-α联合实验组与对照组相比，对T24/ADM细胞P-gp表达率差异也无统计学意义(P>0.05)，两者联合也不影响T24/ADM细胞P-gp的表达率。结论：1.CsA与TNF-α均可不同程度逆转T24/ADM细胞的耐药性。2.CsA与TNF-α联合使用逆转效果好于单独使用，两者呈协同作用。3.CsA和TNF-α无论是单独还是联合均不影响T24/ADM细胞P-gp的表达。